MANUAL DE PRACTICAS DE FISIOLOGIA VEGETAL

MANUAL DE PRACTICAS DE FISIOLOGIA VEGETAL
Facultad de Ciencias Agropecuarias - UNER
B. DESARROLLO
B.1. INDUCCION DE CALLOS, UTILIZANDO LA TECNICA DE CULTIVO

“IN VITRO”
Introducción:
El cultivo de tejidos, como técnica, consiste esencialmente en aislar una porción de la
planta (explanto) y proporcionarle artificialmente las condiciones físicas y químicas apropiadas
para que las célulasexpresen su potencial intrínseco o inducido. Se basa en el concepto de
"totipotencialidad" de las células vegetales, que dice: "una célula vegetal o grupo de células
colocadas en condiciones adecuadas es capaz de regenerar un individuo completo e idéntico
al que le dio origen".
El cultivo "in vitro" de células, tejidos y órganos vegetales, permite estudiar todos los
factores que influyen sobreel metabolismo, crecimiento y desarrollo de los vegetales, ya que
numerosas condiciones (químicas, físicas y biológicas) pueden ser controladas y variadas
según su objetivo determinado. Esto permite que estas técnicas tengan un campo de acción
muy amplio dentro de la investigación científica.
Las principales áreas de acción que se desarrollan en la actualidad son:
1- Producción de productosfarmacéuticos: se puede orientar el mecanismo vegetal hacia la
producción de un determinado compuesto, obteniendo muy altas relaciones de producción de
dichas sustancias. Por ejemplo: esencias de plantas aromáticas, sacáridos para jarabes,
edulcorantes.
2- Mejoramiento genético de cultivos:
a) cultivo de embriones, ovarios u óvulos.
b) cultivo de anteras y microsporas
c) cultivo deprotoplastos
d) cultivo de callos y suspensiones celulares
Se pueden obtener variante genéticas con resistencia o tolerancia a diversas
adversidades del medio y a patógenos.
3- Recuperación de clones enfermos y su conservación en bancos de germoplasma: a través
de técnicas de termoterapia (tratamiento de plantas a altas temperaturas) y posterior cultivo "in
vitro" de meristemas, para obtener plantas"libres" de virus.
4- Multiplicación clonal rápida de plantas seleccionadas (micropropagación): consiste en la
propagación "in vitro" de plantas a partir de meristemas, yemas, estacas u otros tejidos.
Es necesario además adoptar procedimientos de asepsia para mantener los cultivos
libres de contaminación microbiana. Aunque estos principios son básicamente invariables en
todos loslaboratorios de cultivo de tejidos vegetales, su aplicación puede presentar
variaciones en magnitud y complejidad, dependiendo de los objetivos del laboratorio; así
mientras que un laboratorio de investigación puede ser pequeño en tamaño pero muy
especializado en equipos e instalaciones, uno de producción comercial tiende a ser más
grande y simple. Un laboratorio de investigación puede también tener unrol de enseñanza y,
en este caso, es frecuente que se asignen en él áreas especiales para la enseñanza y
demostración.
Manual de Prácticas de Fisiología Vegetal - Edición digital - Lallana, V.H. y Lallana Ma. del C. (2003) Pág. ⇒ 81

El laboratorio de cultivo de tejidos debe disponer
de un área destinada al
establecimiento, crecimiento y multiplicación de especies producidas; esta área esespecialmente necesaria en los laboratorios de investigación y desarrollo y en los de
producción comercial. Finalmente, la decisión de establecer un laboratorio de cultivos de
tejidos requiere de un estudio y análisis crítico acerca de la necesidad de hacerlo, dentro de
un contexto integral del desarrollo de la investigación y la producción agrícola o forestal de la
región o país. Por lotanto, el establecimiento y funcionamiento del laboratorio debe ser,
idealmente, el producto de esfuerzos multidisciplinarios.
Usando técnicas de cultivo de tejidos la formación de callos puede ser inducida en
numerosos órganos y tejidos de plantas, que usualmente no desarrollan callos en respuesta a
un daño. El material vegetal comúnmente cultivado incluye, cambium vascular, parénquima de...