Manual Del Laboratorio Del Cultivo De Tejidos

Instituto Politécnico Nacional Unidad Profesional Interdisciplinaria de Biotecnología Laboratorio de Cultivo de Tejidos 

INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE BIOTECNOLOGÍA DEPARTAMENTO DE BIOPROCESOS ACADEMIA DE BIOTECNOLOGÍA

MANUAL DEL LABORATORIO DE CULTIVO DE TEJIDOS

ELABORADO POR: Dr. Jesús Agustín Badillo Corona Dra. María del Carmen OliverSalvador IBt. Karen Gisela Moreno Guerrero Biol. Verónica Pacheco González IBt. Hernán Cortes Arroyo

México D. F. Agosto 2009

Manual elaborado por Jesús Agustín Badillo Corona, María del Carmen Oliver Salvador, Karen Gisela Moreno Guerrero, Verónica Pacheco González y Hernán Cortés Arroyo

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Relación de prácticas No. 1 2 3 4 5 Titulo Germinación de semillas de diversas especies en condiciones de asepsia Preparación de medios de cultivo para la generación de callos y micropropagación Establecimiento de un cultivo de callos de explantes de zanahoria (Daucus carota). Micropropagación de violeta africana Saintpaulia ionantha Wendi. Regeneración de plantas completasa partir de explantes de hojas de Nicotiana tabacum Numero de sesiones* 4 5 4 5 5

*La sesiones necesarias para la realización de cada práctica no son necesariamente continuas.

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Práctica 1. Germinación de semillas de diversas especies en condiciones de asepsia. INTRODUCCION Durante el desarrollo de una planta los procesos de formación de semillas y de germinación son procesos absolutamente indispensables para la dispersión y perpetuación de la especie. Por este motivo, averiguar los mecanismosque gobiernan la germinación de semillas ha sido esencial para comprender tanto el papel reproductivo de éstas, como el papel que juegan en un contexto ecológico que tiene implicaciones de competitividad y dispersión. Hasta el día de hoy se han identificado 4 requerimientos abióticos básicos necesarios para la germinación: 1. Agua, mediado principalmente por el potencial hídrico del ambiente y dela semilla. Se considera que es el factor determinante para que se realice la germinación (si no hay agua no hay germinación). 2. Oxígeno, el cual ingresa a la semilla en forma gaseosa o disuelto en agua. 3. Temperatura, específica para cada especie. 4. Luz, no es considerada un factor determinante, pero si un promotor de la germinación.

La semilla contiene al embrión generado por lafecundación en la planta madre y el éxito que tenga para su supervivencia depende mucho de su habilidad para germinar en el lugar y momento apropiado. Esto se asocia a mecanismos adaptativos que previenen la germinación en ausencia de un ambiente adecuado, lo que se denomina latencia de semillas. En estos casos las estructuras de la semilla restringen cualquiera de los factores antes mencionados, enespecial el agua y el oxígeno, con lo cual se limita la germinación. Dentro de los procesos y factores reconocidos para la liberación de las semillas del estado de latencia se encuentran los siguientes:

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Post maduración (afterrippening): se obtiene cuando la semilla ha reducido el nivel de humedad por desecación.

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Escarificación natural. Se refiere a la permeabilización de la testa producto de la degradación de ésta por diversos medios naturales (microorganismos, desgaste mecánico, paso...