Manual Susceptibilidad

Gobierno de Chile
Ministerio de Salud

PRUEBA DE SUSCEPTIBILIDAD ANTIMICROBIANA POR DIFUSIÓN EN AGAR
TM M. Soledad Prat M.
Lab. Susceptibilidad
Sección Bacteriología
1.0 INTRODUCCIÓN
Variados métodos de laboratorio pueden ser usados para determinar in vitro la
susceptibilidad de bacterias ante agentes microbianos. En muchos laboratorios de
microbiología clínica, el test de difusión en agar esusado en forma rutinaria para
bacterias de rápido crecimiento y algunas bacterias fastidiosas patógenas. Este
documento incluye un método estandarizado de difusión en disco descrito por el
Laboratorio Internacional de Referencia: National Committee for Clinical
Laboratory Standars (NCCLS).
Los ensayos de susceptibilidad basados solamente en la presencia o ausencia
de una zona de inhibición sinimportar su tamaño, no son aceptables. Resultados
confiables sólo se pueden obtener con un disco de ensayo de difusión que use el
principio de metodología estandarizada y con medidas de diámetro de zona
correlacionados con la determinación de Concentración Inhibitoria Mínima (CIM)
con cepas conocidas susceptibles y resistentes a varios antibióticos.
Los métodos descritos aquí deben ser seguidosdetalladamente para obtener
resultados reproducibles. El método que actualmente recomienda el Sub Comité
de Ensayos de Susceptibilidad de NCCLS está basado en el método originalmente
descrito por Bauer et al., (método de Kirby-Bauer). Este es el método de difusión
en disco en que se han desarrollado estándares para su interpretación y está
apoyado por datos clínicos y de laboratorio.
2.0 INDICACIONES
Losensayos de susceptibilidad están indicados para apoyar la quimioterapia
antimicrobiana de tratamiento en procesos infecciosos por bacterias en las que la
identidad del microorganismo no es suficiente para predecir en forma confiable su
susceptibilidad. Estos ensayos son a menudo indicados cuando se piensa que el
organismo causante pertenece a una especie capaz de mostrar resistencia a los
agentesantimicrobianos más comúnmente usados. Los mecanismos de
resistencia incluyen la producción de enzimas inactivantes de la droga, que alteran
el objetivo, o alteran la acción.
Existen aún microorganismos que tienen susceptibilidad predecible a agentes
antimicrobianos y con terapias empíricas ampliamente reconocidas. Las pruebas
de susceptibilidad rara son vez necesarias cuando la infección esproducida por un
organismo con una reconocida susceptibilidad a una droga (ej. susceptibilidad del
Streptococcus pyogenes a la penicilina en USA). Las pruebas de susceptibilidad
son también importantes en estudios epidemiológicos de resistencia y en estudios
de nuevos agentes antimicrobianos.
Las colonias aisladas de cada tipo de microorganismo que pueda desempeñar
un rol patógeno debería serseleccionadas de un agar primario y probar su
susceptibilidad. Los procedimientos de identificación a menudo son realizados al
mismo tiempo. Mezclas de diferentes microorganismos no deberían probarse en
una misma placa de ensayo de susceptibilidad. La práctica de realizar la prueba
de susceptibilidad directamente con material clínico (por ej. fluidos estériles y
orina) deberían evitarse excepto en casos deemergencia cuando la tinción de
Gram sugiere un patógeno único. Cuando las pruebas de susceptibilidad se han
realizado directamente con material clínico, se debe repetir usando metodología

estandarizada. Cuando la naturaleza de la infección no es clara y el espécimen
contiene crecimiento mixto o flora normal, una prueba de susceptibilidad es a
menudo innecesaria y podría conducir a resultadoserróneos.

3.0 SELECCIÓN DE SENSIDISCOS E INFORME
La selección del antimicrobiano más apropiado para probar e informar debe ser
una decisión de cada laboratorio clínico en consulta con el médico de
enfermedades infecciosas, y el comité de control de infección. Los antimicrobianos
indicados en la tabla NCCLS son los de eficacia clínicamente comprobada para
los distintos microorganismos.
3.1...