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INTRODUCCIÓN
Los métodos de biología molecular se aplican cada vez más al diagnóstico de las enfermedades
infecciosas y al desarrollo de vacunas. Para que estos métodos se lleguen a utilizarampliamente,
es preciso que sean fáciles, seguros, sensibles, reproducibles y finalmente automatizados para
facilitar la evaluación de gran cantidad de muestras.
El propósito de este capítulo esproporcionar una información básica general para el personal no
especializado. Dos entregas de la Revisión Técnica y Científica de la OIE tratan de biotecnología y
el diagnóstico de enfermedadesanimales, y se pueden consultar para una revisión más detallada
(103, 104). A continuación se describen brevemente los temas tratados en este capítulo.
A. Detección de ácidos nucleicos
1. Reacciónen cadena de la polimerasa (PCR) y PCR en tiempo real
2. Diagnóstico mediante el polimorfismo de la longitud de los fragmentos de restricción y
estrategias basadas en las relaciones entre los ADN3. Diagnóstico mediante sondas de ADN y la tecnología de las micromatrices de ADN
4. Extracción del ácido nucleico
B. Detección de proteínas
1. Inmunohistoquímica
2.Inmunoelectrotransferencia
3. Enzimoinmunoensayo de captura antigénica (ELISA)
4. Proteómica
C. Detección de anticuerpos
1. ELISA competitivo (C-ELISA)
2. Producción de antígenos mediante la tecnología del ADNrecombinante
D. Vacunas
1. Vacunas bacterianas con delección génica
2. Vacunas marcadas y pruebas diagnósticas complementarias
3. Vacunas con vectores víricos
4. Vacunas de ADN
5. Otros avancesen la tecnología de las vacunas
A. DETECCIÓN DE ÁCIDOS NUCLEICOS
Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y PCR en tiempo real
La PCR aprovecha los mecanismos de replicación natural del ADN ytiene como resultado la producción in vitro
de grandes cantidades de una secuencia deseada de ADN a partir de una mezcla compleja de secuencias
heterogéneas (134). La PCR puede amplificar una...