Marcha Bacteriologic
INCUBADO EN UNA JARRA CON VELA, ATMOSFERA CO2, POR 24 HORAS A 37o C
ENCENDIDA.
AS
(+)
FROTE DE GRAM. (cocos gram+ en parejas, en cadenas y sueltos).
BUSCAR COLONIAS ALFA HEMOLITICAS
BUSCAR COLONIAS BETA HEMOLITICA
Picar con un asa de argolla las colonias Beta hemolítica, si forma halotransparente. (se sospecha de S. pyogenes)
Picar con un asa de argolla las colonias Alfa hemolíticas, si forma halo verde. (se sospecha de S. pneumoniae)
EFECTUAR PRUEBAS: BACITRACINA, Con un asa recta estéril, trasladar una sola colonia al centro de otra caja de agar sangre de carnero. Tocar la superficie del medio rotando el asa sin pinchar, luego con un asa en argolla estriar en 3direcciones opuestas luego colocar con pinzas estériles en el centro del inoculo un disco de bacitracina taxo A de 0.04 unidades, Interpretar como Streptococcus pyogenes si se produce un halo de inhibición.
EFECTUAR PRUEBAS: OPTIQUINA:
2 o 3 colonias sospechosas se estrían en el centro de un agar sangre de carnero, haciendo un sembrado masivo de 3 cm de diámetro.
Se coloca en el centro un discode Optoquina taxo P. Se incuba toda la noche en una jarra con vela. Interpretar como Streptococcus pneumoniae si la prueba es positiva.
BILIS ESCULINA: se realiza en tubo el cual contiene la bilis (color verde) si después de 24 hrs. De incubación el color vira a negro es positivo. (Enterococcus)
PRUEBA DE CAMP: Identificación presuntiva de Streptococcus agalactiae (grupo “B”) Hacer con elasa en argolla una estría recta a lo largo de toda la caja con una cepa de Staphylococcus aureus productor de doble zona de beta hemólisis.
- Luego con sumo cuidado hacer una estría con el Streptococcus beta hemolítico a identificar, perpendicular a la estría del S. aureus, pero q no la toque. Interpretar como Streptococcus agalactiae del grupo “B” de Lancefield si se produce una “flecha” deintensa beta de Staphylococcus aureus.
S/A PARA GRAM+ EN MH CON AGAR SANGRE.
MARCHA BACTERIOLOGICA PARA UROCULTIVO
MUESTRA DE ORINA
Tomar la muestra con un asa calibrada de 0.001 ml, frente al mechero flamear la boca del frasco.
Sembrar la muestra verticalmente y luego en zigzag
Incubar por 24 hrs. A 35-37o C, atmosfera O2, interpretar los resultadosRealizar pruebas de identificación (Batería para Gram- y para Gram+
Contar las colonias y multiplicar el conteo por 1000
REPORTAR ASÍ: CRECIERON MAS DE 100,000 UFC/ml
Reportar así: crecieron mas de 100,000 UFC/ml.
Sensibilidad antibiótica, en M-H si son gram- o Staphylococcus y si son Streptococcus AS o M-H con suplemento 5% de sangre.
MARCHA BACTERIOLOGICA PARA LCR Y LIQUIDOPLEURAL
SEMBRAR
MUESTRA
CENTRIFUGAR 1000 RPM 2-5 MIN
AGAR CHOCOLATE
AGAR SANGRE
EXAMEN MICROSCOPICO:
FROTE DE GRAM,
FROTE DE ZIEHL-NEELSEN
TINTA CHINA
AGAR Mc-CONKEY
AGAR TAYER MARTIN
MEDIOS OPCIONALES
TAMBIEN SEMBRAR: SABOURAUD, MYCOSEL Y LEWSTEIN-JENSEN
S/A. para Gram (+) y (-) en M-H, ASC y ACH.
MARCHABACTERIOLOGICA PARA NEISSERIA GONORRHEAE
MUESTRA DE SECRESION VAGINAL O URETRAL
FROTE DE GRAM
INOCULAR EN AGAR SANGRE, TAYER MARTIN, AGAR CHOCOLATE Y AGAR Mc-CONKEY
INCUBAR A 37o C DURANTE 24hr O 48 hrs. ASEPTUANDO EL AGAR MC-CONKEY
EL AGAR TAYER MARTIN ENCONTRAREMOS COLONIAS PEQUEÑAS Y ROGOSAS DE COLOR GRISASEO UN POCO TRANSPARENTE LA SUPERFICIE CON MARGENES LISOS NO SEOBSERVARA HEMOLISIS
PRUEBA DE OXIDASA ESTE SE REALIZA INOCULANDO UNA COLONIA DE LA BACTERIA COLONCANDOLO SOBRE UN DISCO DE OXIDASA MOJADO CON AGUA DESTILADA
REALIZAR UNA PRUEBA DE OXIDACION EN AZÚCAR.. ESTA CONSISTIRA EN INOCULAR UNA COLONIA EN LOS TRES TUBOS DE AZUCAR DEPOSTITANDO 2 ASADAS BIEN CARGADAS Y CERRAR BIEN LOS TUBOS E INCUBAR DURANTE 48-72 HORAS A UNA TEMPERATURA 37o C....
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