MARCO TEÓRICO HPLC-EDULCORANTES
Páginas: 4 (783 palabras)
Publicado: 20 de marzo de 2013
4. MARCO TEÓRICO
4.1 CROMATOGRAFÍA LÍQUIDA DE ALTA RESOLUCIÓN
La Cromatografía Líquida de Alta Resolución es actualmente la técnica de separación más ampliamente utilizada debido a suversatilidad y amplio campo de aplicación1, utiliza presiones muy elevadas para forzar el paso del disolvente por medio de las columnas. Tiene la posibilidad de usar solventes en manera de gradientespara optimizar la separación de analitos en matrices complejas y reducir los tiempos de análisis, sin sacrificar la resolución.
En este método se usan columnas de diámetro muy reducido, porejemplo 2 mm rellenas de materiales especiales pulverulentos, cuyas partículas tienen un tamaño no mayor de 30-40 µm y con frecuencia hasta de 5 ó 10 µm, generalmente con una distribución de tamaños nomayor de ± 2 µm Este tipo de columna es muy eficaz, pero ofrece una gran resistencia al flujo de la fase móvil, es decir una gran caída de presión2.
Por esta razón es necesario emplear sistemas debombeo de alta presión que hagan fluir la fase móvil a una velocidad razonable a través de la columna. La cantidad de fase estacionaria dentro de la columna es pequeña, por lo que se requiere que lamuestra también sea pequeña3.
El usuario comienza por colocar la muestra preparada en una bandeja para una inyección automática en un loop de 20 µL para luego ir dentro de la columna. Elsolvente es bombeado continuamente a través de la columna, la presión puede alcanzar hasta los 600 atm de presión. Los compuestos separados son detectados continuamente por un detector tan pronto ellosabandonan la columna.
Los sistemas de detección acoplada a HPLC son habitualmente la espectrofotometría UV-Vis (normalmente mediante detector de diodos en fila, DAD) la absorción UV proporciona engeneral una sensibilidad adecuada, el uso de DAD ha permitido mejorar la selectividad del método ya que permite la medida a distintas longitudes de onda, lo cual facilita la minimización del efecto...
4.1 CROMATOGRAFÍA LÍQUIDA DE ALTA RESOLUCIÓN
La Cromatografía Líquida de Alta Resolución es actualmente la técnica de separación más ampliamente utilizada debido a suversatilidad y amplio campo de aplicación1, utiliza presiones muy elevadas para forzar el paso del disolvente por medio de las columnas. Tiene la posibilidad de usar solventes en manera de gradientespara optimizar la separación de analitos en matrices complejas y reducir los tiempos de análisis, sin sacrificar la resolución.
En este método se usan columnas de diámetro muy reducido, porejemplo 2 mm rellenas de materiales especiales pulverulentos, cuyas partículas tienen un tamaño no mayor de 30-40 µm y con frecuencia hasta de 5 ó 10 µm, generalmente con una distribución de tamaños nomayor de ± 2 µm Este tipo de columna es muy eficaz, pero ofrece una gran resistencia al flujo de la fase móvil, es decir una gran caída de presión2.
Por esta razón es necesario emplear sistemas debombeo de alta presión que hagan fluir la fase móvil a una velocidad razonable a través de la columna. La cantidad de fase estacionaria dentro de la columna es pequeña, por lo que se requiere que lamuestra también sea pequeña3.
El usuario comienza por colocar la muestra preparada en una bandeja para una inyección automática en un loop de 20 µL para luego ir dentro de la columna. Elsolvente es bombeado continuamente a través de la columna, la presión puede alcanzar hasta los 600 atm de presión. Los compuestos separados son detectados continuamente por un detector tan pronto ellosabandonan la columna.
Los sistemas de detección acoplada a HPLC son habitualmente la espectrofotometría UV-Vis (normalmente mediante detector de diodos en fila, DAD) la absorción UV proporciona engeneral una sensibilidad adecuada, el uso de DAD ha permitido mejorar la selectividad del método ya que permite la medida a distintas longitudes de onda, lo cual facilita la minimización del efecto...
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