MARGEN DE ERROR E LA CÁMARA DE NEUBAUER


ERROR POR CARGA INCORRECTA DE LA CÁMARA DE NEUBAUER.
Es bastante común cargar la cámara de Neubauer con una cantidad de muestra ligeramente superior o inferior a 10 microlitros. En el primer caso, el cubreobjetos se levanta ligeramente para alojar el exceso de líquido ; en el segundo caso, la cámara alojará menos de 10 microlitos introduciendo un error.
Nuestra estimación es que este errorno supera el 3-5%.
Reducción del error:

1) Ser muy cuidadoso a la hora de introducir la muestra en la
cámara observando que no haya líquido en exceso.

2) Algunos técnicos, calientan ligeramente el cubreobjetos con
su aliento, antes de colocarlo sobre la cámara de recuento.
Posteriormente observan que unos anillos multicolor se crean
sobre la superficie del cubreobjetos indicando que estábien
adherido. Así se evita que se levante cuando el líquido
rebose.

3) Mantener las micropipetas perfectamente calibradas.


ERROR ESTADÍSTICO.
Este error se produce al intentar aproximar una población (muestra original) con una muestra de dicha población demasiado pequeña (volumen de recuento).
La mayoría de técnicos de laboratorio utilizan 4 ó 5 recuadros de la cámara de recuento,independientemente de la concentración.
Este error alcanza frecuentemente el 20-30%.

Reducción del error:
1) Para reducir este error, debería tenerse en cuenta el tamaño de la muestra a la hora de calcular la concentración y el número de muestras tomadas.

Para un cultivo de 100 ml, realizando recuento con cámara de Neubauer.

Concentración
Número muestras (1)


Márgen Máximo de Error(confianza. 95%)
Márgen Máximo de Error
(confianza. 90%)

1.0 x 106 cel/ml

1



43,10%

36,19%





1.0 x 106 cel/ml
2

30,49%
25,59%

1.0 x 106 cel/ml

3


24,89%

20,59%

1.0 x 106 cel/ml

4


21,56%

18,09%

NOTA: Se realiza la estimación de error asumiendo un coeficiente de variación del 22% para las muestras (estamación basada en nuestra experiencia con miles de conteos realizados en cámara deNeubauer)
(1) Se considera una muestra (estadística), un recuento de 5 recuadros en cámara de Neubauer.

2) Como regla general, algunos laboratorios cuentan 80 ó 100 células, independientemente de la concentración. Esto a veces implica cargar varias cámaras de recuento para calcular una concentración, si ésta es muy baja.

ERROR EN LA DISTRIBUCIÓN DE LAS CÉLULAS EN LA CÁMARA.
En algunasocasiones, la muestra no se distribuye de forma regular en la cámara de recuento, debido a inclinaciones de esta o a su manipulación
Reducción del error:

1) Procure que la cámara de recuento se encuentre
completamente plana a la hora de introducir la muestra.

2) Agite bien la muestra antes de introducirla en la cámara de recuento.ERRORES HUMANOS.
Existen varios tipos de errores que son provocados por la persona que realiza el recuento, directa o indirectamente:

 Mala visualización de la muestra. Si la persona que tiene que realizar el conteo no visualiza correctamentela muestra, puede dejar de contar células, o contar artefactos confundiéndolos con células
Reducción del error: Utilización de un buen microscopio, en un buen estado de conservación. Realizar la manipulación del microscopio correctamente y con la óptica adecuada al tamaño celular.

 Dejar de contar células que están en otro plano. Si la persona que tiene que realizar el conteo no visualizacorrectamente la muestra, puede dejar de contar células, o contar artefactos confundiéndolos con células
Reducción del error: Utilización de un buen microscopio, en un buen estado de conservación. Realizar la manipulación del microscopio correctamente y con la óptica adecuada al tamaño celular

 Perder la cuenta / confusión al contar. Si la persona que realiza el recuento pierde la cuenta,...