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Páginas: 3 (718 palabras)
Publicado: 4 de abril de 2013
CETIS 62
BIOMETRIA HEMATICA
GUILLERMINA RODRIGUEZ CAZARES
REPORTE DE LA PRACTICA: DETERMINACION DE HEMOGLOBINA: METODO DE LA CIANMETAHEMOGLOBINA
DANIELA GUADALUPE GARCIA ORTEGA
LABORATORISTACLINICO
4° F
21-03-2013
DETERMINACION DE LA HEMOGLOBINA: METODO DE CIANMETAHEMOGLOBINA
FUNDAMENTO
Este método tiene como fundamento la transformación previa de lahemoglobina en cianmetahemoglobina (HiCN), que es muy estable y posee un color característico cuya absorbancia a 540 nm puede ser cuantificada comparándola con la de varias soluciones deconcentraciones conocidas de hemoglobina preparadas a partir del patrón de referencia ( curva de calibración). Los distintos compuestos de hemoglobina, excepto la sulfohemoglobina que casi nunca es significativa,se transforman en HiCN según el siguiente proceso:
Hemoglobina +Ferricianuro potásico -metahemoglobina
Metahemoglobina +Cianuro potásico cianmetahemoglobina
MATERIAL Y REACTIVOS
1.Espectrofotómetro o fotocolorímetro: Estos instrumentos deben ser calibrados periódicamente mediante la solución patrón HiCN, preparada de acuerdo a las especificaciones del international commitee forStandardization in Hematology (ICSH)
2. Tubos: 12 x 100mm.
3. Sangre venosa total: anticoagulada con EDTA-K3 (1,5 mg/ml) o con heparina (10 UI/ml.)Puede emplearse sangre capilar.
4. Pipetas volumétricas: devidrio y de 5ml.
5. Pipeta automática: de 20 ul, debidamente calibradas.
6. Reactivo de Cianmetahemoglobina.
Composición (p H 7-7,4)
Ferricianuro Potásico [K3 Fe(CN)6] 200mg
Cianuropotásico [CNK] 50mg
Fosfato monopotasico [KH2PO4] 140mg
Detergente no iónico* 1ml
Agua destilada hasta 1000ml
PROCEDIMIENTO
A. ELABORACION DE LA CURVA DE CALIBRACION
La grafica decalibración tiene como finalidad calibrar el espectrofotómetro para una lectura determinada calculando la corrección existente entre los valores de A leídos en el aparato y los correspondientes valores...
BIOMETRIA HEMATICA
GUILLERMINA RODRIGUEZ CAZARES
REPORTE DE LA PRACTICA: DETERMINACION DE HEMOGLOBINA: METODO DE LA CIANMETAHEMOGLOBINA
DANIELA GUADALUPE GARCIA ORTEGA
LABORATORISTACLINICO
4° F
21-03-2013
DETERMINACION DE LA HEMOGLOBINA: METODO DE CIANMETAHEMOGLOBINA
FUNDAMENTO
Este método tiene como fundamento la transformación previa de lahemoglobina en cianmetahemoglobina (HiCN), que es muy estable y posee un color característico cuya absorbancia a 540 nm puede ser cuantificada comparándola con la de varias soluciones deconcentraciones conocidas de hemoglobina preparadas a partir del patrón de referencia ( curva de calibración). Los distintos compuestos de hemoglobina, excepto la sulfohemoglobina que casi nunca es significativa,se transforman en HiCN según el siguiente proceso:
Hemoglobina +Ferricianuro potásico -metahemoglobina
Metahemoglobina +Cianuro potásico cianmetahemoglobina
MATERIAL Y REACTIVOS
1.Espectrofotómetro o fotocolorímetro: Estos instrumentos deben ser calibrados periódicamente mediante la solución patrón HiCN, preparada de acuerdo a las especificaciones del international commitee forStandardization in Hematology (ICSH)
2. Tubos: 12 x 100mm.
3. Sangre venosa total: anticoagulada con EDTA-K3 (1,5 mg/ml) o con heparina (10 UI/ml.)Puede emplearse sangre capilar.
4. Pipetas volumétricas: devidrio y de 5ml.
5. Pipeta automática: de 20 ul, debidamente calibradas.
6. Reactivo de Cianmetahemoglobina.
Composición (p H 7-7,4)
Ferricianuro Potásico [K3 Fe(CN)6] 200mg
Cianuropotásico [CNK] 50mg
Fosfato monopotasico [KH2PO4] 140mg
Detergente no iónico* 1ml
Agua destilada hasta 1000ml
PROCEDIMIENTO
A. ELABORACION DE LA CURVA DE CALIBRACION
La grafica decalibración tiene como finalidad calibrar el espectrofotómetro para una lectura determinada calculando la corrección existente entre los valores de A leídos en el aparato y los correspondientes valores...
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