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IDENTIFICACION DE MARCADORES GENETICOS...

IDENTIFICACION DE MARCADORES GENETICOS DEL AGENTE CAUSAL DEL
MARCHITAMIENTO DEL CLAVEL Fusarium oxysporum f.sp. dianthi
MEDIANTE AMPLIFICACION ARBITRARIA DE FRAGMENTOS POLIMORFICOS
DE ADN
IDENTIFICATION OF GENETIC MARKERS OF Fusarium oxysporum f.sp.
dianthi , THE CARNATION CURLING AGENT, USING THE RANDOM AMPLIFIED
POLYMORPHIC DNA (RAPD) TECHNIQUEHernandez J1., Arbelaez G2., Junca H1., Posada M1., Del Portillo P1.
RESUMEN
La técnica de Amplificación Arbitraria de
Fragmentos Polimórficos de ADN (RAPD) fue
utilizada para identificar marcadores genéticos
útiles para el desarrollo de un método diagnóstico
para Fusarium oxysporum f.sp. dianthi, el agente
etiológico de la enfermedad del marchitamiento
del clavel. Con el fin deidentificar fragmentos
genéticos característicos de este patógeno, un
total de 18 aislados diferentes, provenientes de
diferentes lugares del mundo y 17 cepas de F.
oxysporum de otras formas especiales fueron
amplificadas utilizando 15 iniciadores diferentes.
Aunque ninguno de los iniciadores empleados
en este estudio amplificó una banda común a
todas las formas especiales dianthi, el iniciadorOPA 17 mostró un patrón de RAPD que permitió
la identificación de cuatro grupos polimórficos
dentro de este grupo taxonómico. Este mismo
iniciador, permitió la discriminación entre
aislados de Fusarium oxysporum f.sp. dianthi y
cepas de F. oxysporum de otras formas
especiales. No se observó una correlación directa
entre el patrón de RAPD y las razas reportadas
para F. oxysporum f.sp.dianthi, previamente
determinadas mediante ensayos biológicos por
otros grupos de investigadores. Los análisis de
hibridación molecular con fragmentos escogidos
de estos patrones de RAPD, permitieron el
reconocimiento selectivo de los cuatro grupos

descritos. Los fragmentos genómicos
identificados, son candidatos para el desarrollo
de un sistema diagnóstico por PCR para este
patógeno delclavel.
Palabras claves: RAPD; Fusarium oxysporum,
polimorfismos, clavel.
SUMMARY
The Random Amplified Polymorphic DNA
(RAPD) technique was used to analyse genetic
markers useful in developing a method to
diagnosis Fusarium oxysporum f.sp. dianthi
infections. To identify characteristic genetic
fragments of this pathogen, 18 strains were
isolated from locations around the world and 17special forms of F. oxysporum (non-.dianthi F.
oxysporum) were amplified using 15 different
primers. None of these primers allowed the
identification of a single amplification band
common to the Fusarium oxysporum f.sp. dianthi
samples. However, the OPA 17 primer
generated an RAPD pattern that allowed the
identification of four amplification groups within
this taxonomic group. The same markerCorporación CorpoGen, Calle 26A No 37-28 Santafé de Bogotá, D.C.
Teléfono: 368 5411/ 4983. Fax: 368 4987 E-mail:
corpogen@colomsat.net.co
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Facultad de Agronomía. Universidad Nacional de Colombia. Santafé
de Bogotá, D.C. Teléfono: 316 5118. Fax: 368 1448. E-mail:
garbelae@bacata.usc.unal.edu.co

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REVISTA COLOMBIANA DE BIOTECNOLOGIA

permitted to distinguish between theFusarium
oxysporum f.sp. dianthi and the special forms
of F. oxysporum. No direct correlation was
observed between the RAPD pattern and the race
of the samples established in previous works.
Molecular hybridization analysis, using the OPA
17 amplified fragments as probes, showed the
feasibility of identifying molecular markers that
can be used in developing a PCR method for
diagnosis ofFusarium oxysporum f.sp. dianthi
infections.

objetivo principal de identificar marcadores genéticos que
puedan ser utilizados para el desarrollo de un sistema
diagnóstico basado en la técnica de la reacción en cadena
de la polimerasa (PCR), para este hongo fitopatógeno.
MATERIALES Y METODOS
Cepas de Fusarium oxysporum: Las cepas de Fusarium
oxysporum f.sp. dianthi y las cepas no dianthi...