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Páginas: 3 (704 palabras) Publicado: 2 de junio de 2014
Técnicas de ADN recombinante
Enzimas de restricción
Un enzima de restricción es aquella que puede reconocer una secuencia característica de nucleótidos dentrode una molécula de ADN y cortar el ADN en ese punto en concreto, llamado sitio o diana de restricción, o en un sitio no muy lejano a este. Los sitios de restricción cuentan con entre 4 y 12 pares debases, con las que son reconocidos. El mecanismo de corte de DNA se realiza a través de la ruptura dedos enlaces fosfodiéster en la doble hebra, lo que da lugar a dos extremos de DNA. Éstos pueden ser romos (cuando los enlaces rotos coinciden) o Cohesivos/escalonados. Estos últimos tienen tendencia avolver a unirse de modo espontáneo, ya que los extremos se pueden unir a otros extremos coincidentes que pueda haber en la cercanía (Apareamiento de Watson & Crick).
Los fragmentos de ADN obtenidos deeste modo pueden unirse por otras enzimas llamadas ligasas.
La clonación
La clonación del DNA puede definirse como la recombinación in vitro de un fragmento de DNAcon un DNA vector con capacidad de una replicación
autónoma. El fragmento de DNA se replicará  junto con el DNA vector en la célula hospedadora y así será posible obtenerlo en un número elevado decopias.
  Las etapas básicas son:
 
1) Extracción y fragmentación específica del DNA del organismo que nos interesa.
2) Unión de los fragmentos de DNA: fragmento del DNA que nosinteresa + vector de transformación y replicación.
3) Introducción en las células receptoras del DNA recombinante.
4) Selección de colonias aisladas que porten moléculas de DNA recombinante. Vectores Los vectores...
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