Materiales y metodos

Materiales y Métodos

Muestreo:

Las muestras fóliales fueron recolectadas en plantaciones de la empresas Agroforestal Anzoátegui, CVG Forestal, Deforsa ySmurfit-Carton de Venezuela, ubicadas en los estado Anzoátegui, Delta Amacuro, Cojedes y Portuguesa, durante el mes de octubre de 2000. El muestreo continúo en el año2001 y culmino en febrero de 2002. El material foliar estudiado fue recolectado de viveros, jardines clónales y plantaciones de 2 a 4 años; en caso de la CVG seevaluaron plantaciones de 4 a 11 años.

Medios de cultivo y aislamiento de los patógenos:

Las muestras fueron observadas bajo una lupa estereoscópica y unmicroscopio compuesto, preparando cortes a mano alzada y coloreados con floxina. Los cortes fueron sembradas en los medios de cultivo agar malta (AM),agar-papa-dextrosa (PDA) y agar agua acidificado con acido láctico al 0.5% (AAA).

Pruebas de patogenicidad:

Para comparar la patogenicidad de cada uno de los patógenosaislados se inocularon plantas de E. urophylla de 8-10 meses de edad obtenidas a partir de semillas suministradas por las compañías CVG y Deforsa. Para determinar silos patógenos eran capaces de penetrar directamente los tejidos del hospedante o si dependían de vías de entrada se realizaron dos tipos de tratamiento: en elprimero, las plantas se inocularon asperjando suspensiones conidiales sobre hojas sanas, y en el segundo, se inocularon hojas a las cuales se les realizaron heridas de1 cm de longitud con una aguja estéril. En cada prueba se inocularon 10 plantas, tres con heridas, tres sin heridas y cuatro testigos con heridas y sin heridas.