Materiales y metodos

Materiales y métodos

El trabajo se realizara en el laboratorio de microbiología de la Universidad Politécnica de Guanajuato. La especie de objeto de estudio es el tomate o jitomate (Lycopersiconesculentum) que será infectada con el hongo Fusarium oxysporum siguiendo la siguiente metodología:
Se escogerá una planta de jitomate de los invernaderos de la UPG que presente los síntomas típicosde marchitamiento vascular, tal como amarillamiento unilateral, achaparramiento y la marchitez (Carrillo-Fasio et al., 2003) de esta planta se tomaran muestra de raíz y parte de tallos que se cortaranen secciones de 0.5cm y se desinfectaran en un solución de hipoclorito de sodio al 2% por 30 segundos, luego serán lavados con agua destilada esterilizada en cuatro ocasiones y posteriormente sesembraran en cajas petri preparadas con el medio de cultivo Komada (Tuite, 1996) medio especifico para Fusarium oxysporum las cuales se incubaran a 28 grados centígrados durante siete días, después dehaber pasado los siete días, el inoculo se incrementara, depositando una sección del medio de cultivo con crecimiento del hongo en un matraz conteniendo el caldo de papa-dextrosa el cual se mantendráen agitación constante a 110rpm y 28 grados centígrados durante siete días (Lugo, 1998) posteriormente se tomaran cuatro plantas de tomate estériles y a las raíces laterales se les realizaranpequeños cortes con tijeras desinfectadas y se sumergirán durante 10 minutos en una suspensión de conidios a una concentración de 7x105/ml la concentración se determinara mediante el conteo con hematocimetroo cámara de Neubauer de acuerdo a la metodología propuesta por French y Hebert (1980), tras transcurrir los 10 minutos estas cuatro plantas se sembraran en macetas con 5kg de tierra estéril cada unay se mantendrá en condiciones ambientales no controlada y se regaran cada tercer día con agua destilada y se observaran las plantas hasta observar los síntomas clásicos de la presencia de Fusarium...