May grunwald -giemsa
El empleo combinado de los colorantes May Grunwald y Giemsa se conoce con el nombre de tinción panóptica de May Grunwald Giemsa.
Se basa enel uso de soluciones preparadas a base de colorantes de acentuado poder policromatófilo y metacromático
Fundamento:
Se basa en el agregado de la solución de May Grunwald formada por eosinato deazul de metileno en alcohol metílico , la que fija el extendido y tiene afinidad por los citoplasmas.
Luego se agrega el colorante Giemsa diluido (en el momento de realizarse la coloración), Estaconstituido por Azures que son derivados por oxidación del azul de metileno. Tiene afinidad por los núcleos y ciertas granulaciones.
La eosina es un colorante ácido por lo tanto tiñe los componentesacidófilos de las células.
El azul de metileno es un colorante básico por lo tanto se une a las fracciones basófilas
Es importante respetar las condiciones de la coloración ya que variaciones de pHpueden alterarla. En esta coloración se trabaja a pH neutro o ligeramente alcalino.
Si se trabaja a pH ácido, habrá mayor cantidad de sustancias cargadas positivamente y se absorberá mayor cantidad deeosina. Los extendidos adquieren una tonalidad rojisa.
Si el pH es muy básico, habrá mayor fijación de azul de metileno y se exagerarán los colores azules.
May Grunwald
Combina la eosina(colorante ácido) con el azul de metileno (colorante básico)
El proceso de tinción empieza con la fijación con metanol cuya acción es fijar la película de sangre por precipitación y adherencia de lasproteínas celulares al portaobjetos de vidrio.
La tinción efectiva se inicia con la adición de un amortiguador al colorante lo que da lugar a su ionización.
La eosina y el azul de metileno sonsensibles a cambios de pH de las diferentes estructuras celulares.
El reactivo en medio acuoso tiene la acción de diferenciar tiñiendo:
Sustancias acidófilas color rojo...
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