mecanica

1
INTRODUCCIÓN

1

Descripción del microorganismo
Clasificación
Características morfológicas y fisiológicas

3
3
5

Epidemiología

8

Patogenicidad

10

Significado clínico

11

Diagnóstico microbiológico
Cultivo
Inmunofluorescencia directa
Serología
Antígeno urinario

13
14
15
16
17

Diagnóstico basado en la detección de ADN
Detección de ADN por PCRordinaria
Detección de ADN por PCR en tiempo real

18
18
19

OBJETIVOS

22

2
MATERIAL Y MÉTODOS

24

Pacientes y muestras

25

Diagnóstico convencional
Cultivo
IFD

25
25
26

Amplificación de ADN en muestras respiratorias
Detección de ADN de Legionella mediante PCR ordinaria:
Legionella DNA presence SBF39 (Symbiosis®)
Detección de ADN de Legionella mediante PCR en tiemporeal:
ProbeTec® (Becton Dickinson®)

26

Amplificación de ADN en muestras de orina

34

Estudio estadístico

35

Tampones y soluciones

36

26
32

3
RESULTADOS

37

Muestras respiratorias
Resultados de PCR ordinaria
Resultados de PCR en tiempo real

38
41
47

Muestras de orina

48

4
DISCUSIÓN

50

5
CONCLUSIONES

56

6
BIBLIOGRAFÍA

59

1INTRODUCCIÓN

En el verano de 1976, se produjo en Filadelfia un brote de neumonía atípica que afectó a los
asistentes a una convención de la Legión Americana organizada en un hotel de la ciudad, el BellevueStratford (Fraser, 1977). Como consecuencia, 34 de las 221 personas afectadas murieron y la
neumonía pasó a llamarse enfermedad del legionario.
Este suceso supuso el inicio de una intensainvestigación que llevó a la descripción de una
nueva clase de bacterias, la familia Legionellaceae (Winn, 1988). Estas bacterias pertenecen al grupo
de los denominados microorganismos fastidiosos, lo que explica las dificultades encontradas para el
aislamiento del organismo responsable del brote. Una vez que se identificó, se comprobó que era una
bacteria desconocida hasta entonces y recibió elnombre de Legionella pneumophila, en honor a los
pacientes afectados y al trofismo de este microorganismo por el pulmón (Sabrià, 2002).

1. DESCRIPCIÓN DEL MICROORGANISMO
1.1 Clasificación
Aunque el estudio de la legionelosis, nombre con el que se conoce la patología causada por las
bacterias del género Legionella, se inició en el año 1976, este género no fue establecido hasta tres
añosmás tarde. En 1979, los estudios de hibridación ADN-ADN realizados por Brenner demostraron
que el agente etiológico de la enfermedad del legionario constituía un nuevo género bacteriano, el
género Legionella, y denominaron L. pneumophila a la especie concreta responsable de la enfermedad
(Brenner, 1979). El género dio nombre a una nueva familia, Legionellaceae, en la que inicialmente seincluyeron tres géneros, Legionella, Fluoribacter y Tatlockia. Sin embargo, análisis posteriores de
ácidos nucleicos confirmaron a la familia Legionellaceae como un grupo monofilético (Figura 1) de la
subdivisión gamma-2 de Proteobacteria (Fields, 2002).

Figura 1. Jerarquía taxonómica del género Legionella.

Entre las bacterias conocidas, estudios filogenéticos basados en la secuencia de ARNr 16S(Figura 2) sitúan a Coxiella burnettii, el agente etiológico de la fiebre Q, como el organismo más
cercano a la familia Legionellaceae.

Figura 2. Árbol filogenético del género basado en análisis de ARNr 16S (modificado de Adekele, 1996).

Dentro del género Legionella se diferencian 48 especies (Tabla 1), de las cuales, hasta el
momento, sólo 20 se han identificado como causantes deenfermedad en el hombre. Basándose en
criterios serológicos, las distintas especies de Legionella se han clasificado en serogrupos. Los
serogrupos 1, 4 y 6 son, de los 15 descritos en L. pneumophila, los que con mayor frecuencia causan
legionelosis.

Especie

Nº de
serogrupos

L. pneumophila
L. bozemanii
L. dumoffii
L. miccdadei
L. longbeachae
L. jordanis
L. wadsworthii
L. hackeliae...