medición de la determinación colorimétrica cuantitativa
Páginas: 2 (446 palabras)
Publicado: 26 de junio de 2014
Introducción
La medición de la determinación colorimétrica cuantitativa de una sustancia cualquiera a evaluar se basa en la capacidad de la anterior para absorber minuciosamente algunaslongitudes de onda de luz incidente. Así, la cantidad de luz absorbida es directamente proporcional al espesor del blanco y a la respectiva concentración. Todo esto se explica en los principios contenidos enlas leyes de Lambert–Beer, expresados en la ecuación A = E c I, donde A determina la absorbancia (o densidad óptica) de la sustancia, E corresponde al coeficiente de extinción molar, c es laconcentración de la solución y finalmente, I es el espesor de la cubeta. (2)
Se debe considerar que existen varios Métodos Colorimétricos tales como:
El método de Biuret que se basa en la formación deun complejo coloreado entre el Cu2+ y los grupos NH de los enlaces peptídicos en medio básico, 1Cu2+ se acompleja con 4 NH.
La intensidad de coloración es directamente proporcional a la cantidadde proteínas (enlaces peptídicos) y la reacción es bastante específica, de manera que pocas sustancias interfieren. La sensibilidad del método es muy baja y sólo se recomienda para la cuantificaciónde proteínas en preparados muy concentrados (por ejemplo en suero).
Así como encontramos el método anterior, también existe el método de Bradford, basándose en la unión de un colorante, ComassieBlue G-250 (también Serva Blue) a las proteínas. El colorante, en solución ácida, existe en dos formas una azul y otra naranja. Las proteínas se unen a la forma azul para
formar un complejoproteína-colorante con un coeficiente de extinción mayor
que el colorante libre. Este método es sensible (1-15 µg), simple, rápido, barato y pocas sustancias interfieren en su determinación. Entre lassustancias que interfieren están los detergentes y las soluciones básicas. (1)
En el presente trabajo practico, se determinó espectrofotométricamente la concentración de las sustancias siguiendo los...
La medición de la determinación colorimétrica cuantitativa de una sustancia cualquiera a evaluar se basa en la capacidad de la anterior para absorber minuciosamente algunaslongitudes de onda de luz incidente. Así, la cantidad de luz absorbida es directamente proporcional al espesor del blanco y a la respectiva concentración. Todo esto se explica en los principios contenidos enlas leyes de Lambert–Beer, expresados en la ecuación A = E c I, donde A determina la absorbancia (o densidad óptica) de la sustancia, E corresponde al coeficiente de extinción molar, c es laconcentración de la solución y finalmente, I es el espesor de la cubeta. (2)
Se debe considerar que existen varios Métodos Colorimétricos tales como:
El método de Biuret que se basa en la formación deun complejo coloreado entre el Cu2+ y los grupos NH de los enlaces peptídicos en medio básico, 1Cu2+ se acompleja con 4 NH.
La intensidad de coloración es directamente proporcional a la cantidadde proteínas (enlaces peptídicos) y la reacción es bastante específica, de manera que pocas sustancias interfieren. La sensibilidad del método es muy baja y sólo se recomienda para la cuantificaciónde proteínas en preparados muy concentrados (por ejemplo en suero).
Así como encontramos el método anterior, también existe el método de Bradford, basándose en la unión de un colorante, ComassieBlue G-250 (también Serva Blue) a las proteínas. El colorante, en solución ácida, existe en dos formas una azul y otra naranja. Las proteínas se unen a la forma azul para
formar un complejoproteína-colorante con un coeficiente de extinción mayor
que el colorante libre. Este método es sensible (1-15 µg), simple, rápido, barato y pocas sustancias interfieren en su determinación. Entre lassustancias que interfieren están los detergentes y las soluciones básicas. (1)
En el presente trabajo practico, se determinó espectrofotométricamente la concentración de las sustancias siguiendo los...
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