Medico Veterinario

Apuntes del

CURSO DE EVALUACION Y CONGELACION DE SEMEN BOVINO

Dr. Decuadro-Hansen
Director Técnico de IMV Cassou Francia

Colaboradores:

Dr. Rumelio Spiazzi
Director Técnico de CLIA

Dr. Andrés García Riva
SENASA

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1 y 2 de mayo de 1997

Centro de Inseminación Artificial

CLIA S.A.
Urdinarrain, Entre Rios Argentina

Criterios de calidad en un Centro deInseminación Artificial
El semen bovino destinado a la inseminación artificial debe responder a los siguientes criterios de calidad: 1º) Calidad sanitaria: Debe estar libre de todo agente patógeno transmisible por semen. 2º) Calidad biológica: 2.a. Un mínimo de 8 millones de espermatozoides con motilidad progresiva rectilínea (MPR) por pajuela después de la congelación y > 25 % de espermatozoides con MPR.2.b. Entre 6 y 8 millones de espermatozoides con MPR si el semen posee >30% de espermatozoides con MPR y una tasa de anormalidades 30% de espermatozoides con MPR y datos de fertilidad (si sobre 300 primoinseminaciones el porcentaje de no retorno 60/90 es equivalente al obtenido con más de 8 millones de espermatozoides con MPR). La concentración óptima de espermatozoides por dosis es torodependiente. En el 20% de los toros no existe correlación significativa entre la concentración por dosis y la tasa de no retorno.
El número de espermatozoides con MPR de una pajuela se obtiene multiplicando el porcentaje de espermatozoides con MPR por el número de espermatozoides totales en la pajuela.

3º) Calidad bacteriológica: Es testigo indirecto de la calidad higiénica del CIA. El objetivo es lograrque el 95% de las pajuelas contengan menos de 500 UFC totales. 4º) Identificación correcta: La pajuela debe estar correctamente identificada. En primer lugar la identificación debe corresponder al semen contenido en la pajuela, en segundo lugar la identificación puede presentar exigencias reglamentarias (ej. en la CEE se identifica es status sanitario del toro para IBR). ISO 9002 da las normas decalidad para un CIA. El primer CIA en adoptarlas fue el de Quebec.

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Criterios de evaluación de un eyaculado

Un eyaculado puede ser congelado si responde a:

Criterios Aspecto Concentración Motilidad masal Motilidad individual % espermatozoides anormales

Frecuencia de control c/eyaculado c/eyaculado c/eyaculado c/eyaculado Sobre los 2dos eyaculados de las 3 primeras colectas cuandocomienza a producir semen, luego sobre el 2do eyaculado 1 vez por mes

Límite de utilización Ausencia de alteraciones ≥0.3 x 109/ml(1) ≥3 ≥70% ≤25%

% espermatozoides con anormalidades mayores

≤15%

(1) no acepta menos porque se produciría un shock osmótico por el glicerol.

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Evaluación de semen
Volumen
Se estima en base al peso, ya que es más exacto que por lectura directa. Seutiliza la fórmula siguiente: Volumen= Peso seminal/densidad promedio del semen (1.05) Dos factores falsean la exactitud de la medida directa del volumen: 1) la espuma y 2) la imprecisión de las graduaciones. Se utilizan tubos de recolección descartables y se pesa con balanza de precisión.

Motilidad masal
Se evalúa en la periferia de una gota gruesa de 5 µl, sobre portaobjetos sin cubre enplatina térmica a 37-38ºC. Se califica de 0 a 5.

Motilidad individual
Diluir 7 µl de semen en 700 µl de diluyente precalentado a 32ºC. De la dilución tomar una gota de 10-12 µl y colocarla entre porta y cubreobjetos precalentados. Se califica el porcentaje de espermatozoides con MPR y el vigor.

Concentración Pueden realizarse 4 tipos de determinaciones:
a) subjetiva por observaciónmacroscópica del aspecto del eyaculado o al evaluar la motilidad masal. b) por hemocitometría. c) por fotometría. d) por coulter counter.

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Uso del fotómetro
• Encender el fotómetro 30 minutos antes de realizar la lectura. • Calibrar con 4 ml de SF(1) (blanco). SF: Cl Na 9 ‰ o 7 ‰. • Pajuela mediana: vol. útil 0.49 ml, vol. total tomado 0.52 ml • Pajuela fina: vol. útil 0.21 ml, vol. total tomado...