Medico

El trabajo pionero de Landsteiner a principios de siglo, que desembocó en el descubrimiento de los grupos sanguíneos y fue la base de lo que hoy conocemos como "Bancos de Sangre", ilustró el potencial de los anticuerpos como herramientas analíticas. Pero fue solamente hacia la mitad de este siglo que estas moléculas comenzaron a ser utilizadas eficientemente para la identificación desubpoblaciones celulares. Esta aplicación analítica de los anticuerpos, es decir, el poder distinguir poblaciones de células funcionalmente distintas pero morfológicamente similares, de tanta importancia en hematología, experimentó un avance sustancial con el advenimiento de la metodología que permitió el cultivo continuo, en condiciones de laboratorio, de las células productoras de los anticuerpos.
Lacélula responsable de la producción de los anticuerpos es un tipo particular de glóbulo blanco denominado "linfocito B". Un principio esencial en inmunología es que cada linfocito B es capaz de producir anticuerpos con una especificidad única (Burnet 19591 Así mismo, toda la descendencia de ese linfocito B, es decir el "clon" que de él se derive, también producirá exactamente el mismo anticuerpo. Por lotanto, para producir anticuerpos idénticos unos a otros, "monoclonales", todo lo que hace falta es poder cultivar en forma continua, en condiciones de laboratorio, un clon de linfocitos B. En el sobrenadante de esos cultivos, se tendrán secretados los anticuerpos monoclonales deseados.
Desgraciadamente, dada su naturaleza "mortal", los linfocitos B son incapaces de crecer en cultivo más allá deuna semana. De esta manera, el obstáculo fundamental para producir anticuerpos en el laboratorio reside en lograr cultivar en forma continua los linfocitos B. A principios de los años setenta ya se disponía de la capacidad técnica para el cultivo in vitro de ciertas células malignas, entre ellas los linfocitos B provenientes de un tipo de tumor llamado mieloma múltiple o plasmacitoma. Estascélulas tienen la capacidad de crecer continua y cionogénicamente, es decir, de forma que una sola célula puede multiplicarse y originar muchas otras idénticas. En 1975, George Köhler y César Milstein, en un trabajo seminal que les valió posteriormente el Premio Nobel, demostraron que es posible fusionar o hibridar células de mieloma con linfocitos B, que los híbridos resultantes heredan la capacidadpara crecer indefinidamente en cultivo y para producir anticuerpos, y que además es posible aislar del producto heterogéneo de fusión. aquellos híbridos productores del anticuerpo en el que se está interesado (Köhler y Milstein, 1975).
En su forma inicial, la técnica descrita por Köhler y Milstein permite la obtención de anticuerpos monoclonales de ratón. Mediante el uso de técnicas similares se hanpreparado reactivos monoclonales provenientes de otras especies e incluso de origen humano (James y Bell, 1987; Glassy, 1993). La presente revisión pretende desarrollar, en una forma accesible al lector no especialista, los aspectos más resaltantes de estas metodologías, haciendo énfasis en las tremendas posibilidades prácticas de estos reactivos y en los avances recientes para su producción.
Elproceso de producción de un anticuerpo monoclonal implica entonces la generación de los híbridos o, más apropiadamente, de los hibridomas productores del mismo y ello involucra una serie de pasos o etapas esenciales, las cuales se describen a continuación.
Producción de Anticuerpos Monoclonales de origen Múrido
Inmunización
En teoría, es factible producir anticuerpos monoclonales específicospara cualquier antígeno capaz de ser reconocido por los linfocitos B. Para la inmunización es conveniente el uso de preparaciones puras de antígeno en las cuales el peligro de competencia antigénica, que pudiese desviar la respuesta inmune humoral hacia una molécula irrelevante, no existe. Pero en muchos casos el antígeno de interés se encuentra en una molécula de la superficie celular difícil...