medio ambiente

A. Sistemas de identificación bioquímica miniaturizados y Enterobacteriaceae

La identificación de microorganismos patógenos y microorganismos alterantes, cultivos iniciadores ("starter cultures"), etc., en microbiología de alimentos, es una parte importante de los métodos microbiológicos. Los métodos convencionales (que datan de hace más de 100 años) utilizaban grandes volúmenes de mediopara examinar una característica particular de una bacteria, por ejemplo: 10 ml de caldo lactosado para observar la fermentación de lactosa por E. coli.

A través de los años, han comenzado a utilizarse sistemas miniaturizados de identificación (manuales o automatizados), en los que, en un solo paso, se examinan varias pruebas bioquímicas con gran ahorro de tiempo, encontramos en el mercadodistintos sistemas multipruebas bioquímicas: API, Enterotube, Minitek, Crystal ID, MicroID, entre otros.

Una batería de pruebas bioquímicas es el mejor medio para la identificación específica de miembros de la familia Enterobacteriaceae.

Principales características de las Enterobacterias;
Las Enterobacteriaceae son bacilos Gram negativos, aerobios y anaerobios facultativos, no esporulados, móvileso inmóviles, que fermentan la glucosa, reducen nitratos y nitritos, son citocromo oxidasa negativos y catalasa positivos.
Principales enterobacterias;
De los integrantes de la familia unos fermentan la lactosa y otros no. Incluye los siguientes géneros:
No fermentadores de lactosa
Fermentadores de lactosa
Salmonella
Shigella
Edwarsiella
Hafnia
Proteus
Providencia
Yersinia
MorganellaErwinia
Escherichia
Enterobacter
Citrobacter
Serratia (a veces)
Klebsiella (excepto.Kb. rhinoscleromatis)


B. El sistema BBL Enterotube II
Batería de pruebas incluidas y tablas de lectura con coloraciones positivas y negativas

BBL Enterotube II es un tubo de plástico con compartimientos, formado por 12 medios de cultivo diferentes, que permiten la determinación de 15 reaccionesbioquímicas.
Está concebido para la inoculación simultánea de los 12 medios con una sola colonia, utilizando, la aguja de inoculación dispuesta en el centro.
La combinación de reacciones resultante, junto con la guía de interpretación (libro de códigos), permite la identificación de Enterobacteriaceae con importancia clínica.


Las reacciones bioquímicas:
Prueba
Reacción / Enzimas
NegativoPositivo
Glucose
fermentación de glucosa
rojo (a naranja)
amarillo (a dorado)
Gas
producción de gas en la fermentación de la glucosa
sin desprendimiento de cera
sin desprendimiento de cera
Lysine
lisina descarboxilasa
amarillo
morado
Ornithine
ornitina descarboxilasa
amarillo
morado
H2S
producción de H2S
de beige a ámbar claro
negro
Indole
producción deindol
incoloro
rojo o rosa
Adonitol
producción de adonitol
rojo (a naranja)
amarillo (a dorado)
Lactose
fermentación/oxidación de lactosa
rojo (a naranja)
amarillo (a dorado)
Arabinose
fermentación/oxidación de arabinosa
rojo (a naranja)
amarillo (a dorado)
Sorbitol
fermentación/oxidación de sorbitol
rojo (a naranja)
amarillo (a dorado)
VP
producción deacetoína (Voges-Proskauer)
de incoloro a ámbar claro
rojo
Dulcitol
utilización del dulcitol
verde
amarillo (a dorado)
PA
fenilalanina descarboxilasa
cualquier tono de verde
de negro a gris oscuro
Urea
ureasa
de incoloro a ámbar claro
de rosa claro a rosa
Citrate
utilización del citrato
verde
azul


Guía de interpretación

Para más información vaya a consultaren los documentos del curso la información de las casas comerciales.

C. Procedimiento de inoculación y lectura del sistema de identificación
A partir de un cultivo puro de bacterias Gram negativas, podemos discernir, mediante la prueba de la oxidasa qué sistema de identificación utilizar.
En el siguiente diagrama de flujo se muestra cuándo debe utilizarse BBL Enterotube II o BBL Oxi/Ferm...