Medio De Cultivo

Objetivos

Preparación de medios de cultivo
Curso: “Métodos en fitopatología” Dr. Pedro Mondino
24 de abril de 2009

Conocer a que denominamos medio de cultivo en el laboratorio de Fitopatología. Reconocer la existencia de diferentes tipos de medio. Reconocer la utilidad de los diferentes medios de cultivo en el trabajo con patógenos de plantas.

Objetivos
El alumno debe: 1) ser capazde elaborar medios de cultivo con el fin de ser utilizados posteriormente para el aislamiento de hongos, bacterias o microorganismos epifíticos. 2) Desenvolverse con soltura en la utilización de protocolos.

Medios de cultivo
Los medios de cultivo de microorganismos (hongos, bacterias, levaduras) son esenciales en el Laboratorio de Fitopatología por lo que a diario se preparan y utilizan. Losmedios de cultivo son una mezcla de nutrientes que, en concentraciones adecuadas y en condiciones físicas óptimas, permiten el crecimiento de los microorganismos.

Condiciones que debe reunir un Medio de cultivo
Para que los microorganismos crezcan adecuadamente, un medio de cultivo artificial debe reunir una serie de condiciones:
contener los nutrientes y factores de crecimiento necesariosdisponer de oxígeno temperatura adecuada humedad pH. exento de microorganismos contaminantes.

Disponibilidad de nutrientes en los Medios de cultivo.
Un medio de cultivo para que permita el crecimiento adecuado de microorganismos debe contener como mínimo: Carbono Nitrógeno Azufre Fósforo Sales inorgánicas que suplan iones (K, Mg, Fe, Ca, etc.).

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Disponibilidad de nutrientes en losMedios de cultivo Estos nutrientes generalmente se aportan con Extracto de malta, Peptona, Papa, extracto de levadura, etc.

Medios de cultivo según su composición
Medios Naturales. Consisten únicamente en un material vegetal. Ejemplos: un trozo de papa. Agar jugo de manzana, Agar durazno, Agar y jugo de vegetales.

Medios de cultivo según su composición
Medios definidos o sintéticos: son losmedios que tienen una composición química definida cuali y cuantitativamente. Generalmente se usan en trabajos de investigación. Ej: Medio Czapek. Nitrato de Sodio 2 g/l Fosfato bipotásico 1 g/l Cloruro de potasio 0,5 g/l Sulfato de magnesio heptahidratado 0,5 g/l Sulfato de hierro heptahidratado 0,01 g/l Sacarosa 30 g/l Agar-agar 15 g/l

Medios de cultivo según su composición
Medios complejos ode composición indefinida: Son medios cuya composición no se conoce con exactitud. contienen nutrientes en abundancia pero sin saber con exactitud la composición cualitativa ni cuantitativa de estos nutrientes. Ej: Agar Papa; Agar Malta;

Medios complejos
Agar Papa Dextrosa: Medio para el cultivo y conteo de levaduras y hongos en general. Agar -15g Dextrosa - 20g Infusión papa - 4g Aguadestilada 1L

Medios de cultivo según su estado físico
Los medios de cultivo utilizados pueden ser de diferentes tipos: Medios sólidos. Medio semisólidos. Medios líquidos.

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Medios de cultivo

Medios sólidos de cultivo
Usualmente para preparar un medio sólido se parte de un medio líquido al que se le añade un agente solidificante como el agar El agar es un polisacárido extraído de algas.En los medios sólidos la proporción de Agar es siempre por encima del 15%

Medios de cultivo
El agar es el elemento solidificante más empleado en la preparación de medios de cultivo. Sus características principales son:
Se licua completamente a temperaturas de 80 –100 ºC y se solidifica al enfriarse a 40 grados. No afecta el crecimiento de hongos ni bacterias. No es utilizado por losmicroorganismos que crecen en él.

Medios semi-sólidos de cultivo
En los medios semi-sólidos la proporción de Agar es de alrededor del 5%

Medio Agar Agua
Se trata de un medio sin el agregado de nutriente alguno. Utilidad
Aislamiento de hongos a partir de tejido vegetal. Se logra que el crecimiento sea el resultado de la nutrición que posee el tejido vegetal. Ensayos de evaluación de actividad...