Medios De Cultivo Bacteriano
XLD Agar fue desarrollado por Taylor para aumentar la eficacia del aislamiento y la identificación de patógenos entéricos, en especial Shigella. No sólo se diferencian los patógenos de los organismos fermentadores de lactosa no patógenos, sino también de muchos organismos no patógenos que no fermentan la lactosa ni la sacarosa. Además, el medio fueformulado para favorecer el crecimiento de Shigella, que a menudo no crecía en otras fórmulas debido a inhibidores tóxicos. Los resultados obtenidos en diversas evaluaciones clínicas ha apoyado la afirmación de la eficacia relativamente alta de XLD Agar en el aislamiento primario de Shigella y Salmonella. XLD Agar es uno de los medios utilizados en las pruebas de límites microbianos en USP y EP.
XLDAgar es un medio selectivo y de diferenciación. Contiene extracto de levadura como fuente de nutrientes y vitaminas. Utiliza el desoxicolato de sodio como agente selectivo y, por consiguiente, inhibe los microorganismos gram positivos. La xilosa se incorpora en el medio dado que la fermentan prácticamente todos los entéricos, excepto Shigella, y esta propiedad hace posible la diferenciación de dichaespecie. La lisina se incluye para permitir la diferenciación del grupo Salmonella de los organismos no patógenos, dado que, sin lisina, Salmonella fermentaría rápidamente la xilosa y no se distinguiría de las especies no patógenas. Cuando la Salmonella agota el suministro de xilosa, la lisina es atacada por la enzima lisina descarboxilasa, lo que genera un cambio a un pH alcalino que imita lareacción de Shigella. Para evitar el cambio similar en los organismos coliformes positivos a la lisina, se añaden lactosa y sacarosa para producir ácido en exceso.
Para aumentar la capacidad de diferenciación de la fórmula, se incluye un sistema indicador de H2S, formado por tiosulfato sódico y citrato férrico amónico, para la visualización del ácido sulfhídrico producido, lo que origina laformación de colonias con centros de color negro. Los organismos no patógenos no productores de H2S no descarboxilan la lisina; por tanto, la reacción ácida producida por dichos organismos evita el oscurecimiento de las colonias, lo que sucede sólo con pH alcalino o neutro.
XLD Agar se utiliza para el aislamiento de Salmonella y/o Shigella a partir de muestras fecales humanas o torundas rectales.Se recomienda especialmente para el aislamiento de Shigella.
Sólo en raras ocasiones es posible recuperar en un único medio a todos los patógenos contenidos en una muestra. Por tanto, para el aislamiento de Salmonella, Shigella y posiblemente otros patógenos entéricos es preciso inocular otros medios con la muestra.
Algunas cepas de Shigella pueden necesitar de 42 a 48 h de incubación. Ciertaspruebas diagnósticas pueden efectuarse directamente en este medio; no obstante, para lograr la identificación completa se necesitan pruebas bioquímicas, y (si así se indica), pruebas inmunológicas usando cultivos puros.
E.M.B. Agar.
Este medio (también denominado E.A.M.) es utilizado para el aislamiento selectivo de bacilos Gram negativos de rápido desarrollo y escasas exigenciasnutricionales. Permite el desarrollo de todas las especies de la familia Enterobacteriaceae.
Fundamento
Este medio combina las fórmulas de Holt-Harris y Teague con la de Levine, para obtener un mejor rendimiento en el aislamiento selectivo de enterobacterias y otras especies de bacilos Gram negativos. La diferenciación entre organismos capaces de utilizar la lactosa y/o sacarosa, y aquellos que sonincapaces de hacerlo, está dada por los indicadores eosina y azul de metileno; éstos ejercen un efecto inhibitorio sobre muchas bacterias Gram positivas. Muchas cepas de Escherichia coli y Citrobacter spp. presentan un característico brillo metálico. Las cepas que utilizan la lactosa poseen centro oscuro con periferia azulada o rosada, mientras que las que no lo hacen son incoloras. Este medio permite...
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