Medios de cultivo,Generalidades, Composición y Preparacion

MEDIOS DE CULTIVO; GENERALIDADES,
COMPOSICIÓN Y PREPARACIÓN
Natalia Escobar V
Camila Ramírez O

Cultivo de Tejidos

Universidad de Cundinamarca
Facultad de Ciencias Agropecuarias
Ing. Agronómica
Fusagasugá- 2013

PRINCIPIOS GENERALES Y ESTRATEGIAS DE
DISEÑO

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Los nutrimientos orgánicos, al igual que los
inorgánicos, se requieren en dos niveles; uno
macro y otromicro.
Generalmente, las células en crecimiento pueden
fabricar sus proteínas a partir de fuentes
adecuadas
de
nitrógeno
y
carbohidratos
suministradas por el medio de cultivo.
Sin embargo, existe además una cantidad de
sustancias orgánicas adicionales que se requieren
en cantidades mínimas y que son muy activas en el
crecimiento.

Tejidos
vegetales

Desde 1940 se han
desarrolladouna gran
cantidad de trabajos sobre sus
requerimientos nutricionales.

La mayor parte
de estos, se
pueden cultivar
exitosamente en
un medio de
cultivo

Se utiliza la sacarosa
como una fuente de
energía, algunos microelementos y otras
sustancias promotoras
del crecimiento

MEDIO BASAL: ELEMENTOS MINERALES
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El primer objetivo en la preparación de un medio
de cultivo essuministrar los nutrimentos
minerales en concentraciones adecuadas.
Se deben incluir:
 Los Macroelementos (C,H,O,N,S,P,K,Ca, y Mg)


Los Microelementos (B,Zn,Mn,Cu,Mo,Fe,Cl )

COMPONENTES DEL MEDIO DE CULTIVO
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Los suplementos vitamínicos que son usados como
mínimo son la tiamina, el acido nicotínico ,la
piridoxina, y el inositol (que es utilizado para la
correcta formación demembranas celulares)
Las principales diferencias entre los medios de cultivo se
relacionan con los diferentes compuestos utilizados para
estimular la división celular

Por ejemplo:
•

Agua de Coco (AC 5-15% v/w)
• 2,4D
• ANA
• AIA

AGUA DE COCO (AC)
En 1942,Van Overbeek, Conklin y Blakes
mostraron que los embriones en desarrollo de
Datura se podían cultivar in-vitro hasta sumadurez, utilizando el endosperma liquido del coco
(Cocus nucifera) como suplemento de un medio de
cultivo estándar.
 El AC, a niveles relativamente bajos (5%-10% v/v),
puede interactuar con las auxinas y promover el
crecimiento en situaciones en que por si sola era
ineficiente.
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DATURA

COMPONENTES DEL AGUA DE COCO
Es un medio muy complejo con una amplia gama
de componentesorgánicos e inorgánicos. Aunque
el AC es muy rica en fosfato y magnesio, no todos
los elementos minerales que contiene son
indispensables y se pueden remplazar por un
medio salino basal.
 El contenido de azúcar es alrededor de 2.5%
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Adicionalmente se encuentra Nitrógeno no
proteico soluble en forma de aminoácido

ALGUNOS AMINOÁCIDOS Y SUS EFECTOS
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En cualquier caso, el papelde los aminoácidos en
la nutrición de los tejidos y células vegetales
cultivadas, se debe considerar como un problema
complejo, ya que algunos tejidos responden
directamente a los suplementos de aminoácidos.
Aunque las proteínas de las plantas contienen
cantidades bajas de aminoácidos sulfúricos como
la cisteína y la metionina, éstos son necesarios
para un crecimiento y desarrollonormales

LEVADURA Y EXTRACTO DE
MALTA
Generalmente se suministran en concentraciones
de 0.5% hasta 1% y de 0.1% v/v.
 Estas sustancias son buenas fuentes de nitrógeno
reducido, de precursores potenciales de las
adenil-citocininas.
 Van Standen et al.(1975) identificaron en el
extracto de malta Difco la ZEA y compuestos
relacionados.
 Muchos investigadores encontraron en el extracto
demalta de cebada era benéfico cuando se
utilizaba como suplemento ( Lowenberg et al.,
1952; Gautheret, 1959).
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VITAMINAS
Las plantas se consideran normalmente
autótrofas para las vitaminas.
 En la mayoría de los medios la tiamina, la
piridoxina y el ácido nicotínico se consideran
benéficas y se añaden de forma rutinaria.
 En la planta la raíces deben obtener su tiamina
del...