medios de cultivo lab
Páginas: 5 (1160 palabras)
Publicado: 5 de abril de 2013
Práctica # 02
ESTERILIZACIÓN DE MATERIAL Y PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO
1. OBJETIVOS
Familiarizar al estudiante con las técnicas básicas utilizadas en el laboratorio de microbiología, preparación de medios de cultivo y esterilización del material de laboratorio.
Aprender las técnicas de preparación de medios de cultivo de diferentes clases y su forma de esterilización.
2.INTRODUCCION
ESTERILIZACIÓN
Es el proceso de destrucción de toda vida microbiana. El término estéril es absoluto; algo está estéril o no lo está. El proceso de esterilización remueve todos los microorganismos que pueden estar presentes en los materiales y medios de cultivo.
Se puede esterilizar por varias vías: con el uso de agentes físicos (calor), radiación, filtración o agentes químicos(desinfectantes). Se debe tener en cuenta el tipo de material y medio de cultivo para aplicar un tipo de esterilización adecuado, este dependerá de la sensibilidad térmica de los materiales.
Todos los medios de cultivo deben estar perfectamente estériles para evitar la aparición de formas de vida que puedan alterar, enmascarar o incluso impedir el crecimiento microbiano normal del o de losespecímenes inoculados en dichos medios. El sistema clásico para esterilizar los medios de cultivo es el autoclave (que utiliza vapor de agua a presión como agente esterilizante) aplicando 121°C por 15-20 minutos a un presión de 1 atmósfera (15 PSI).
MEDIOS DE CULTIVO
Uno de los sistemas más importantes para la identificación de microorganismos es observar su crecimiento en sustancias alimenticiasartificiales preparadas en el laboratorio.
Un medio de cultivo es un sustrato estéril que contiene elementos inhibitorios o nutricionales que permiten o regulan el crecimiento y la multiplicación bacteriana. El crecimiento de los microorganismos es el Cultivo.
Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo microorganismocontaminante. Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura, grado de humedad y presión de oxígeno adecuado, así como un grado correcto de acidez o alcalinidad.
El agar es un elemento solidificante muy empleado para la preparación de medios de cultivo. Se licúa completamente a la temperatura del aguahirviendo y se solidifica al enfriarse a 40 grados. Con mínimas excepciones no tiene efecto sobre el crecimiento de las bacterias y no es atacado por aquellas que crecen en él.
Preparación de medios de cultivo
La introducción y perfeccionamiento de los medios de cultivo, ha significado un adelanto fundamental en bacteriología permitiendo el aislamiento, estudio e identificación de bacterias.
Sepreparan según las indicaciones precisas del productor (Merck, Gibco, Sigma, etc.). Comúnmente se pesa la cantidad de medio requerida y se hidrata con agua destilada, para luego solubilizar con calor durante un tiempo establecido por el fabricante.
Clasificación de medios de cultivo
Según el estado físico, que depende de la concentración de agar en la composición del medio de cultivo, seclasifican en:
Sólidos: 1 – 2% agar
Semisólidos: 0,2 - 0,5% agar
Líquido: 0%
Según la composición, se clasifican en:
Para usos generales: no selectivos, para cultivo de una amplia variedad de organismos, poseen material nutrido pobre. Constituyen la base para la preparación de otros medios más elaborados. Ej. Caldo peptonado, agar nutritivo.
Selectivos: (pueden ser de moderada o de altaselectividad) se añaden sustancias que inhiben el crecimiento de ciertos grupos de bacterias, permitiendo a la vez el crecimiento de otras. Variando las sustancia añadidas, se varía el tipo y grado de selectividad (Mac Conkey, EMB, Baird Parker)
Enriquecidos: ralentizan/suprimen el crecimiento de la flora competitiva normal potenciando el cultivo y crecimiento deseado (caldo Selenito cistina)....
Práctica # 02
ESTERILIZACIÓN DE MATERIAL Y PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO
1. OBJETIVOS
Familiarizar al estudiante con las técnicas básicas utilizadas en el laboratorio de microbiología, preparación de medios de cultivo y esterilización del material de laboratorio.
Aprender las técnicas de preparación de medios de cultivo de diferentes clases y su forma de esterilización.
2.INTRODUCCION
ESTERILIZACIÓN
Es el proceso de destrucción de toda vida microbiana. El término estéril es absoluto; algo está estéril o no lo está. El proceso de esterilización remueve todos los microorganismos que pueden estar presentes en los materiales y medios de cultivo.
Se puede esterilizar por varias vías: con el uso de agentes físicos (calor), radiación, filtración o agentes químicos(desinfectantes). Se debe tener en cuenta el tipo de material y medio de cultivo para aplicar un tipo de esterilización adecuado, este dependerá de la sensibilidad térmica de los materiales.
Todos los medios de cultivo deben estar perfectamente estériles para evitar la aparición de formas de vida que puedan alterar, enmascarar o incluso impedir el crecimiento microbiano normal del o de losespecímenes inoculados en dichos medios. El sistema clásico para esterilizar los medios de cultivo es el autoclave (que utiliza vapor de agua a presión como agente esterilizante) aplicando 121°C por 15-20 minutos a un presión de 1 atmósfera (15 PSI).
MEDIOS DE CULTIVO
Uno de los sistemas más importantes para la identificación de microorganismos es observar su crecimiento en sustancias alimenticiasartificiales preparadas en el laboratorio.
Un medio de cultivo es un sustrato estéril que contiene elementos inhibitorios o nutricionales que permiten o regulan el crecimiento y la multiplicación bacteriana. El crecimiento de los microorganismos es el Cultivo.
Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo microorganismocontaminante. Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura, grado de humedad y presión de oxígeno adecuado, así como un grado correcto de acidez o alcalinidad.
El agar es un elemento solidificante muy empleado para la preparación de medios de cultivo. Se licúa completamente a la temperatura del aguahirviendo y se solidifica al enfriarse a 40 grados. Con mínimas excepciones no tiene efecto sobre el crecimiento de las bacterias y no es atacado por aquellas que crecen en él.
Preparación de medios de cultivo
La introducción y perfeccionamiento de los medios de cultivo, ha significado un adelanto fundamental en bacteriología permitiendo el aislamiento, estudio e identificación de bacterias.
Sepreparan según las indicaciones precisas del productor (Merck, Gibco, Sigma, etc.). Comúnmente se pesa la cantidad de medio requerida y se hidrata con agua destilada, para luego solubilizar con calor durante un tiempo establecido por el fabricante.
Clasificación de medios de cultivo
Según el estado físico, que depende de la concentración de agar en la composición del medio de cultivo, seclasifican en:
Sólidos: 1 – 2% agar
Semisólidos: 0,2 - 0,5% agar
Líquido: 0%
Según la composición, se clasifican en:
Para usos generales: no selectivos, para cultivo de una amplia variedad de organismos, poseen material nutrido pobre. Constituyen la base para la preparación de otros medios más elaborados. Ej. Caldo peptonado, agar nutritivo.
Selectivos: (pueden ser de moderada o de altaselectividad) se añaden sustancias que inhiben el crecimiento de ciertos grupos de bacterias, permitiendo a la vez el crecimiento de otras. Variando las sustancia añadidas, se varía el tipo y grado de selectividad (Mac Conkey, EMB, Baird Parker)
Enriquecidos: ralentizan/suprimen el crecimiento de la flora competitiva normal potenciando el cultivo y crecimiento deseado (caldo Selenito cistina)....
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