Medios de cultivo

Universidad Interamericana de Puerto Rico Recinto de Barranquitas Departamento de Ciencias y Tecnología Prof. Ángel R. Núñez Laboratorio Biol 3105 I. Título: Preparación de Medios de Cultivo

II.

Objetivos: 1. Identificar los elementos necesarios para la preparación de medios de cultivo en un laboratorio de Microbiología. 2. Aplicar los factores de conversión necesarios en la preparación demedios de cultivo. 3. Demostrar la importancia del uso correcto de los instrumentos claves para la preparación de los medios de cultivo. 4. Desarrollar destrezas básicas para la preparación de medios de cultivo.

III.

Trasfondo:

El uso de medios de cultivo para el estudio de microorganismos se remonta al siglo 18. Un medio de cultivo tiene que poseer los nutrientes necesarios para poderrecuperar (crecer), multiplicar, aislar e identificar los microorganismos. Existen diversos tipos de medio, que pueden diferir entre otras cosas, por su estado físico (sólidos, líquidos, semi-sólidos). Robert Koch, fue el primer científico que logró cultivar bacterias en medio de cultivo sólido. Antes de eso se utilizaban trozos de vegetales u otros alimentos como por ejemplo, la papa (era uno delos más utilizados). Sin embargo, existía la problemática del crecimiento de hongos que afectaban los estudios con las bacterias. En un principio el medio de cultivo que Koch utilizó contenía gelatina como el agente solidificante. No obstante, le presentaba un problema ya que a la temperatura de 37° C (la del cuerpo humano y a la que crecen los patógenos en el cuerpo), la gelatina se derretía. Esentonces cuando se introduce el agar. El agar es un polisacárido derivado de algas rojas cuya habilidad para permanecer en estado sólido a 37° C, promovió su uso sobre la gelatina. Walter Hesse, un colega de Koch, descubrió dichas propiedades y le recomendó a Koch su uso; éste lo adoptó y permanece hoy día como el agente solidificante principal de los medios de cultivo sólidos. Otras propiedadesútiles del agar es que facilita el estudio de los microorganismos porque es prácticamente transparente. Adicionalmente, la gran mayoría de las bacterias no pueden degradar el agar a diferencia de la gelatina (la que sí pueden).

Los medios de cultivo eran dispensados en unos recipientes o platos que en el caso de Koch, eran planos. Para el 1887 Richard Petri realizó unas modificaciones muy útilesal diseño de Koch, y desarrolló lo que hoy nosotros conocemos como el plato o la placa Petri. Los medios de cultivo que se utilizan en los laboratorios de microbiología van desde los más simples, que promueven el crecimiento de los microorganismos en general, hasta los más específicos, como es el caso de los medios selectivos y diferenciales. El agar nutriente así como el caldo nutriente, son unosde los medios más básicos pero fundamentales en todo laboratorio de microbiología. Son utilizados para mantener cultivos de bacterias. Están hechos de variadas fuentes que suplen carbono y nitrógeno como es el caso de los aminoácidos, purinas, pirimidinas, monosacáridos, polisacáridos y distintos tipos de lípidos. Aunque los medios de cultivo pueden ser distribuidos ya preparados, por lo general,se prefiere adquirir los ingredientes y prepararlos en el mismo laboratorio. Es una opción útil y permite a los estudiantes de microbiología aprender a preparar medios de cultivo. Sin embargo, es importante que se aprenda a utilizar apropiadamente los instrumentos necesarios, y más aún, a realizar los cálculos pertinentes que faciliten la preparación de los medios de cultivo. Preparación de MediosA. Uso Correcto de las Balanzas

Uno de los aspectos fundamentales en la preparación de medios de cultivo es la utilización adecuada de las balanzas. Los medios de cultivo por lo general vienen en forma de polvo, por lo que para su preparación es requerido utilizar la balanza. El pesaje de las sustancias granuladas es esencial para la preparación de medios de cultivo microbiológicos. Siempre...