Medios de cultivo

Cabronio 5.9

Medios de Cultivo
y
Pruebas Bioquímicas

Medios
de
Cultivo

INTRODUCCIÓN

Uno de los sistemas más importantes para
la identificación de microorganismos es
observar su crecimiento en sustancias
alimenticias artificiales preparadas en el
laboratorio.

El material alimenticio en el que crecen los
microorganismos es el Medio de Cultivo y
el crecimiento de losmicroorganismos es
el Cultivo.

Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial
debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura, grado de
humedad y presión de oxígeno adecuado, así como un grado correcto de
acidez o alcalinidad.

El agar es un elemento solidificante muy empleado para la preparación de
medios de cultivo. Se licúa completamente a latemperatura del agua
hirviendo y se solidifica al enfriarse a 40 grados. Con mínimas excepciones
no tiene efecto sobre el crecimiento de las bacterias y no es atacado por
aquellas que crecen en él.

Medios de Cultivo
Clasificación de los medios de cultivo basándose en su
composición química
A.- Medios sintéticos o químicamente definidos. Llevan fuente de carbono,
fuente de nitrógeno,sales que suplan iones (P, K, Mg, Fe, Ca), otros
elementos como son estimuladores del crecimiento (eritritol para Brucella
abortus) pero siempre a concentraciones conocidas.

B.- Medios complejos o de composición indefinida. Estos medios llevan
ingredientes como extracto de levadura, peptona, infusión de cerebro,
extracto de carne, etc. que contienen nutrientes en abundancia pero sin
sabercon exactitud la composición cualitativa ni cuantitativa de estos
nutrientes.

C.- Medios de enriquecimiento. Son medios complejos (normalmente) con
aditivos adicionales para favorecer el crecimiento de determinados
microorganismos (particularmente heterótrofos exigentes).
Ejemplo: adicción de sangre, suero o extractos de tejidos de animales y plantas.
D.- Medios selectivos. Son aquellosque favorecen por su diseño el crecimiento
específico de un microorganismo particular (o grupo de microorganismos). Es de
gran utilidad para el aislamiento de microorganismos a partir de una población
microbiana mixta.

Ejemplo: CO2 como fuente de carbono es selectivo para autótrofos; adicionando
cristal violeta se inhibe el crecimiento de los Gram. (+); utilizando maltosa como
única fuentede carbono sólo crecerán los que usen maltosa.

E.- Medios diferenciales. Son aquellos destinados a facilitar la
discriminación de microorganismos de una mezcla por sus propiedades
diferenciales de crecimiento en dichos medios.

Ejemplo: Agar sangre diferencia hemolíticos de no hemolíticos; McConkey
diferencia lactosa (+) de lactosa (-).

F.- Medios de mantenimiento. Suelen serdistintos a los de crecimiento
óptimo ya que el crecimiento rápido y prolífico suele ocasionar la muerte
rápida de las células.
Ejemplo: al añadir glucosa y utilizarla los microorganismos producen
ácidos, acidificándose el medio por lo que es preferible no utilizar glucosa
en los medios de mantenimiento.

Agar-Agar

Agar Nutritivo
Medio de cultivo utilizado para propósitos generales, para elaislamiento de
microorganismos poco exigentes en lo que se refiere a requerimientos
nutritivos.
Su uso está descrito en muchos procedimientos para el análisis de
alimentos, aguas y otros materiales de importancia sanitaria.
Fórmula (en gramos por litro)

Instrucciones

Pluripeptona

5.0

Extracto de carne

3.0

Cloruro de sodio

8.0

Agar

15.0

pH final: 7.3Suspender 31 g de polvo por litro de agua
destilada. Mezclar y dejar reposar 5
minutos. Calentar suavemente agitando y
hervir 1 o 2 minutos hasta su disolución.
Distribuir y esterilizar a 121 C durante 15
minutos.
0.2

Fundamento
Es un medio usado para el cultivo de
microorganismos poco exigentes en sus
requerimientos
nutricionales.
No
contiene
inhibidores del desarrollo bacteriano.
La...