medios de cultivo

Anexo A. Preparación de medios de cultivo

1. Agar nutritivo
Componentes
Por componentes
Peptona de carne
Extracto de carne
Agar
Agua destilada
Casa comercial
Medio base
agua
pH

g/L
5
30
20
1000
20
20
1000
7.2

2. Agar King B
Componentes
Por componentes
Peptona proteos
MgSO4
K3HPO4*3H2O
Glicerol
Agua destilada
Casa comercial
Medio basa
glicerol
agua
pH

g/L20
1.5
1.8
10
1000 ml
33.3
10 g
990
7.2

3. Agar avena al 5% con nistatina al 1%
Componentes
Ojuelas de avena
Agar
Agua destilada
Casa comercial
Medio base
agua
pH

g/L
50
20
1000
72.5
1000
7.2

123

4. Agar PDAA
Componentes
Infusión papa (200 g papa)
GLucosa
agar
Agua destilada
Comercial
Base
agua
pH

g/L
4
2
20
1000
39.9
1000
5.5

5. Agarczapeck
Componentes
Sacarosa
NaNO3
MgSO4
FeSO4
KCl
K2HPO4
agar
Agua destilada 1 litro
pH

g/L
30
3
0.5
0.02
0.5
1
20
1000
7.2

6. caldo SMRS1 sin indicador de pH
Componentes
Sulfato de amonio
Cloruro de potasio
Sulfato de magnesio
Sulfato de manganeso
Sulfato de hierro heptahidratado
Cloruro de sodio
Glucosa
Extracto de levadura
Fosfato de tricálcico
Agua destilada 1litro
pH

g/L
0.5 g/l
0.2 g/l
0.3 g/l
0.004 g/l
0.0004 g/l
0.2 g/l
10 g/l
0.1 g/l
5 g/l
7.2

Recomendaciones: El fosfato tricálcico se esteriliza en seco por aparte para adicionarlo al
medio una vez esté estéril. En un erlenmeyer de 1000 mL se pesan los demás componentes

124

y se llevan a agitación constante ajustando el pH a 7.2. Autoclavar a 150 psi por 15
minutos. Servir45 ml en cada frasco y almacenar en nevera.
7. caldo SMRS1 sin indicador de pH

Componentes
Sulfato de amonio
Cloruro de potasio
Sulfato de magnesio
Sulfato de manganeso
Sulfato de hierro heptahidratado
Cloruro de sodio
Glucosa
Extracto de levadura
Púrpura de bromocresol
Fosfato tricálcico
Agar
pH

g/L
0.5 g/l
0.2 g/l
0.3 g/l
0.004 g/l
0.0004 g/l
0.2 g/l
10 g/l
0.5 g/l0.1 g/l
5 g/l
20 g/l
7.2

Recomendaciones: Al igual que el caldo SRMS1 el fosfato tricálcico se esteriliza en seco
aparte de los demás componentes. En una fiola de 1000 mL se pesan los demás
componentes y se llevan a agitación constante ajustando el pH a 7.2. Autoclavar a 150 psi
por 15 minutos y servir 20 mL en cada una de las cajas de petri.
8. Agar Picovskaya
Componentes
GlucosaCloruro de sodio
Sulfato de amonio
Sulfato de Magnesio
Sulfato de Manganeso
Extracto de Levadura
Agua destilada
Fosfato tricálcico
Agar

g/L
10 g
0.2g
0.5g
0.1g
0.1g
0.5g
1000 ml
5g
20g

Recomendaciones: El fosfato tricálcico se esteriliza en seco aparte de los demás
componentes. Se pesan los demás reactivos y se adicionan en una fiola de 1000 mL,
llevando a agitación constante.Ajustar el pH a 7.2 y autoclavar a 150 psi por 15 minutos a
121°C. Una vez el medio estéril se adiciona el fosfato tricálcico y se sirve en las cajas de
petri. 7.0

125

9. Agar YMA
Componentes
Manitol
Extracto de levadura
K2HPO4
KH2PO4
CaCl2 * 2H2O
MgSO4 * 7H2O
NaCl
Agar
Agua Destilada
Rojo Congo 0.1% p/v
Pesar 0,1 g de rojo congo y disolver
en 100 ml de agua

g/L
10 g
0.80.2 g
0.1 g
0.1 g
0.2 g
0.1 g
15 g
993 ml
7 ml

10. Agar Ashby
Componentes
Manitol
KH2PO4
MgSO4 x 7H2O
FeSO4 x 7H2O
NaCl
CaCl2 x 2H2O
Agar
Agua Destilada
pH

g/L
20 g
1g
0.2 g
0.0005 g
0.2 g
0.2 g
20 g
1000 ml
7.0

11. Agar semisolido NFB
Componentes
Acido D-málico
Solución 10% K2HPO4
Solución 10% MgSO4
Solución 10% NaCl
Solución 1% CaCl2 * H2O
Solución 0.5%Azul de bromotimol en 0.2N
KOH
Solución de micronutrientes (semisólido)
Solución 1.64 % de EDTA/.
Ajustar pH 7.2 para disuelva el EDTA
KOH
Agua destilada
Agar

g/L
5g
5 ml
2 ml
1 ml
2 ml
2 ml
2 ml
4 ml
4.5 g
982 ml
10 g

126

pH
Agua destilada

6.8
1000 ml

- Solución de micronutrientes para NFB
Componentes
Molibdato de sodio dihidratado
Sulfato de manganeso...