Medios de cultivo

2. objetivos
2.1 objetivo general
Aprender a preparar un medio de cultivo, realizar la respectiva siembra del microorganismo, y la tinción mediante la tecnica de gram para realiar la observación al microscopio
2.2 objetivos especificos
Preparar el medio de cultivo apartir de sus componentes sólidos
Aprender a realizar la siembra del microorganismo por medio la ténica de estriamientoPreparar la muestra y colorerarla mediante la tinción gram
Observar las placas al microscopio y recnocer los microorganismos
3. marco teorico
Medios de cultivo
Un medio de cultivo es un sustrato o una solución de nutrientes que permite el desarrollo de microorganismos. En las condiciones de laboratorio para realizar un cultivo, se debe sembrar sobre el medio de cultivo elegido las muestras enlas que los microorganismos van a crecer y multiplicarse para dar colonias.
Los microorganismos son los seres más abundantes de la tierra, pueden vivir en condiciones extremas de pH, temperatura y tensión de oxígeno, colonizando una amplia diversidad de nichos ecológicos. Entre los requerimientos más importantes para su desarrollo están el carbono, el oxígeno, nitrógeno, dióxido de carbono ehidrógeno. Muchas bacterias sin embargo necesitan del aporte extra de factores de crecimiento específicos en forma de suero, sangre y extracto de levadura entre otros.

medios de cultivo solidos
presentan un agente solidificante. La ventaja es que detectará los múltiples tipos de bacterias que pueden encontrarse en una muestra.

Siembra

Sembrar o inocular es introducir artificialmente unaporción de muestra (inóculo) en un medio adecuado, con el fin de iniciar un cultivo microbiano, para su desarrollo y multiplicación. Una vez sembrado, el medio de cultivo se incuba a una temperatura adecuada para el crecimiento.
Las reglas fundamentales para efectuar la siembra exigen:
Que se efectúen asépticamente
Que los medios de cultivo y el instrumental a utilizar estén esterilizadosQue se realicen solo los manipuleos indispensables
Que se trabaje fuera de toda corriente de aire. De ser posible utilizando un
mechero o bien Flujo laminar.
Existen diferentes tipos de siembra de acuerdo al medio utilizado y los requerimientos del microorganismo a estudiar.
Siembra en estría: Se siembra el material  en la superficie de el agar inclinado en un tubo de ensayo,  allí seextiende por toda la superficie con el asa bacteriológica, previamente esterilizada y cargada con el material a sembrar, haciendo estrías no muy amplias, pero tampoco muy estrechas. Se inicia por la parte más profunda de la superficie inclinada  y se termina la estría en la parte más cerca de la boca del tubo.
4. parte practica
4.1 materiales equipos y reactivos
Para la preparación del cultivo:reverbero
- matraz de 500 mL
- balanza
- Lampara de alcohol
- autoclave
- cajas petri
- probeta
- cinta indicadora de esterilidad
- asa y agua bacteriologica
- lamina porta objetos
- microscopio

Reactivos
Mc Conkey agar
- agua destilada
- cristal violeta
- lugol
- decolorante
- safranina
- aceite de inmersion


4.2 métodos y técnicas
Para preparar el medio de cultivoDisolver 16 g del agar Mc Conkey en 320 mL de agua destilada
Homogeneizar en el matraz hasta que se disuelva la mezcla
Hacer hervir en el reverbero
Llevarlo al autoclave durante 30 minutos
- verter el medio de cultivo en las cajas petri de 12 a 15 mL por caja
Esperar a que se solidifique

Para la siembra
- esterilizar el asa y la aguja bacteriológica flameandola sobre la lampara de alcohol- enfriar el asa en uno de los costados del medio de cultivo
- tomar una muestra del microorganismo a sembrar y proceder hacerlo mediante la tecnica de estria
Para la tinción gram
- fijar la muestra
- colocar cristal violeta por un minuto y lavar
- añadir lugol por un minuto y lavar
- adicionar decolorante durante 30 segundos
- colocar safranina durante un minuto y lavar
- secar la...