Medios De Cultivo

Páginas: 8 (1841 palabras) Publicado: 29 de enero de 2013
BASE DE AGAR GC |
Uso:
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La Base de Agar Gelosa Chocolate es un medio utilizado con varios suplementos para el aislamiento y cultivo de Neisseria gonorrhoeae y otros microorganismos fastidiosos. Este medio también es conocido como Base de Agar GC.
FÓRMULA: (aproximada en g/L)
Mezcla de Peptonas | 15.0 g | Fosfato Dipotásico | 4.0 g |
Almidón de Maíz | 1.0 g | Fosfato Mono potásico |1.0 g |
Cloruro de Sodio | 5.0 g | Agar Bacteriológico | 10.0 g |
pH 7.2 ± 0.2 | | | |
PREPARACIÓN:
Método
Suspender 36 g del medio en 500 ml de agua purificada para obtener una base de doble concentración, mezclar y dejar reposar durante 5 minutos, calentar con agitación frecuente hasta completar la disolución del polvo y hervir durante un minuto. Por otro lado, preparar 500 ml de unasolución de hemoglobina al 2% adicionando gradualmente agua a 10 g de hemoglobina seca para obtener una solución uniforme. Esterilizar ambas soluciones en autoclave a 121 ºC durante 15 minutos. Enfriar las soluciones a una temperatura de 45-50 ºC, mezclar y agregar los demás ingredientes dependiendo del medio que se desee preparar. Homogenizar y vaciar en placas petri estériles.
ProcedimientoProcesar las muestras y sembrar las placas inicialmente en forma de Z y posteriormente estriando. Incubar en atmósfera aeróbica enriquecida con CO2 a 35 ± 2 °C por 18 a 24 y hasta 48 horas y observar el crecimiento. Proceder a la identificación.
PRESENTACIONES:
Medio deshidratado: Frasco 450 g y 500 g, Caja c/20 sobres p/1 litro, Cubeta 5 kg y 10 kg. Medio preparado:
AGAR GELOSA CHOCOLATE(adicionada de hemoglobina y poli enriquecimiento). Paquete con 10 placas.AGAR THAYER MARTIN (adicionada de hemoglobina, poli enriquecimiento e Inhibidor VCNT). Paquete con 10 placas.
EL AGAR MACCONKEY es un tipo de gelatina que se produce de unas algas rojas. Se usa ampliamente en microbiología por sus propiedades al utilizarse para el aislamiento y cultivo de bacilos Gram negativos de fácildesarrollo, aerobios y anaerobios facultativos.Adicionalmente sirve como selector de bacterias lactosa filas en muestras clínicas, de agua y alimentos. La razón de la selección es que de bacterias Gram positivas no admiten las lactosas que se encuentran en el medio. Por fermentación de la lactosa, disminuye el pH alrededor de la colonia. Esto produce un viraje del color del indicador de pH (rojoneutro), la absorción en las colonias, y la precipitación de las sales biliares. 
Los microorganismos no fermentadores de lactosa producen colonias incoloras. Instrucciones de preparación de MacConkey1º Preparar una solución con la formula siguiente: Fórmula (Gr/litro) |
  Peptona | 17.0 |
  Pluripeptona | 3.0 |
  Lactosa | 10.0 |
  Mezcla de sales biliares | 1.5 |
  Cloruro de sodio | 5.0 |  Agar | 13.5 |
  Rojo neutro | 0.03 |
 Cristal violeta | 0.001 |
2. Suspender 50 g / litro de Agar y Reposar 5 minutos y mezclar hasta uniformar.3. Calentar suavemente y hervir 1 a 2 minutos hasta disolver.4. Esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos.Uso en medio a analizarPara su utilización se necesita insertar en el medio a analizar a relación 1-15 esto es se debe añadir 1 mlde muestra y agregar aproximadamente 15 ml de medio de cultivo a 45-50 ºC.Para el desarrollo de las pruebas se debe preparar Durante 18-48 horas, a 35-37 ºC, en atmósfera aeróbicaResultados del análisis serán los siguientes.  Elementos | Identificadores |
Escherichia coli ATCC 25922 | Rojas con halo turbio |
Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 | Rosadas mucosas |
Salmonella typhimurium ATCC14028 | Incoloras, transparentes |
Shigella flexneri ATCC 12022 | Incoloras, transparentes |
Proteus mirabilis ATCC 43071 | Incoloras, transparentes |
Enterococcus faecalis ATCC 29212 | Diminutas, incoloras, opacas |
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AGAR SAL Y MANITOL | |
USO:El Agar Sal y Manitol es utilizado para el aislamiento y diferenciación de estafilococos a partir de muestras clínicas y diversos...
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