Medios de cultivo

Agar con almidón.
Este medio se destina al cultivo de microorganismos para la determinación de la capacidad de hidrólisis de almidón.

Tipo de medio diferencial

composición:

Extracto de carne, 3g
Almidón soluble, 10g
Agar, 12g

Preparación:

Disolver los componentes en un baño de agua caliente y ajustar el pH a 7,5. Dispensar en tubos y autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. Dejarenfriar los tubos inclinados. Una prueba positiva se revela añadiendo solución de lugol (ver Tinción de gram) por la aparición de zonas incoloras alrededor de las colonias;

si la prueba es negativa el medio se tiñe totalmente de azul-púrpura.

Agar Nutritivo

Es un medio de cultivo de uso general para microorganismos poco exigentes.

Tipo de medio general

 Composición:

 Extracto decarne, 3g
 Peptona, 5g
 Agar,15 g
 Agua destilada hasta 1000 ml

 Preparación:

 Se disuelven extracto de carne y peptona en una parte de agua por calentamiento hasta que la solución sea transparente. Añadir a continuación el agar y el agua restante agitando hasta ebullición. Ajustar el pH a 7 y esterilizar en autoclave durante 15 minutos a 121 ºC. A continuación se distribuye en placasPetri.

Agar de Tripticasa de Soja (TSA)

Utilizado para el crecimiento de germenes exigentes como brucella o streptococcus y se manifiesta por un color rosa del medio.

Composición:

Triptosa, 15g
Peptona, 5g
Extracto de levadura, 3g
Glucosa, 5g
Cloruro sódico, 5g
Agar, 15g
Agua destilada, 1000 ml

 Preparación:

 Se disuelven todos los componentes excepto el agar en una parte deagua por calentamiento hasta que la solución sea transparente. Añadir a continuación el agar y el agua restante agitando hasta ebullición. Ajustar el pH a 7 y esterilizar en autoclave durante 15 minutos a 121 ºC. A continuación se distribuye en placas Petri.

Agar de Simmons con citrato.

Tipo de medio= diferencial
Medio recomendado para la diferenciación e identificación de enterobacteriasen base a la utilización de citrato como única fuente de carbono. Al medio se le añade azul de bromotimol y agar 1.5%. Los microorganismos capaces de utilizar el citrato crecen en el medio alcalinizándolo, virando el color desde verde (inicial) a azul oscuro en 24-48 horas.

composición:

Sulfato magnésico, 0.2g
Dihidrógeno fosfato de amónio, 1g
Hidrógeno fosfato de dipotasio,1g
Citratosódico, 2g
Cloruro sódico, 5g
Agar, 15g
Azul de bromotimol, 0.08g
Agua destilada, 1000ml

Preparación:

Disolver todos los componentes en un baño de agua caliente y ajustar el pH a 7. Dispensar en tubos y autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. Dejar enfriar los tubos en pendiente.

Agar McC:

Tipo de medio: diferencial - selectivo

Prueba en agar McConkey. Este es un medio diferencialpara la selección y recuperación de bacilos gram-negativos; las sales biliares y el cristal violeta inhiben el crecimiento de bacterias gram-positivas. Los organismos fermentadores de lactosa crecen formando colonias rojas-rosas mientras que los no fermentadores de lactosa forman colonias incoloras o blancas.

composición:

Bacto-peptona, 17g
Proteosa-peptona, 3g
Lactosa, 10g
Sales biliares,1.5g
NaCl, 5g
Agar, 13.5g
Rojo neutro, 0.03g
Cristal violeta, 0.001g
Agua destilada, 1000ml

Preparación:

 Se utiliza un medio comercial deshidratado (Difco). Para rehidratarlo disolver 50g de medio en 100ml de agua destilada y calentar (mediante un baño de agua) hasta que el medio se disuelva completamente. Ajustar el pH a 7,1 y esterilizar en autoclave a 121 ºC durante 15 minutos.Distribuir en placas.

Agar cerebro corazón

Medio de cultivo general.

El agar cerebro-corazón aisla hongos patógenos a partir de material clínico como muestras de infecciones oculares.

Composición:

Infusión de 200g de cerebro

200g de corazón de ternera.

Proteasa-peptona

Dextrosa

Cloruro de sodio

Agar

Preparación y almacenamiento

Disolver completamente 52 g de...