Metabolismo del glutatión y desarrollo posnatal del pulmón de la rata
Páginas: 2 (393 palabras)
Publicado: 17 de octubre de 2010
Metabolismo del glutatión y desarrollo posnatal del pulmón de la rata
Glutathione metabolism during postnatal development of the rat lung
Alejandro Ramírez1,2,a, Tatiana Reyes1,2, LeonelLiberona1,2,b, Andrea Bustamente1,2, Claudia Sáez2,3,c, Gisella Borzone1,2.
1Departamentos de Enfermedades Respiratorias y 3Hematología y 2Centro de Investigaciones Médicas, Facultad de Medicina, PontificiaUniversidad Católica de Chile. Santiago, Chile.
aAlumno de Medicina, Pontificia Universidad Católica de Chile
bBioquímico cPhD
Medición de la actividad específica de las enzimas que participanen el metabolismo del glutatión. Se realizó en el homogeneizado del pulmón completo para los animales de 7, 15 y 21 días de vida y en homogeneizados de cada uno de los tres fragmentos de pulmón deanimales de 50 y 70 días.
La actividad de la enzima GPx (glutatión oxidasa) se midió con el método de Gunzler y cois1 , usando tert-butilhidroperóxido como sustrato, para evitar la participación en lareacción de la enzima catalasa, presente en la muestra. Una unidad de GPx en las condiciones experimentales se definió como aquella que cataliza la oxidación de 1 µmol de glutatión por minuto. Losresultados se expresaron como mU/mg proteína.
La actividad de la enzima glutatión reductasa (GRd) se midió con el método de Smith y cois16. Una unidad de GRd en las condiciones usadas se definió comoaquella que cataliza la reducción de 1 µmol de DTNB a TNB por minuto. Los resultados se expresaron como mU/mg proteína.
Niveles de glutatión total y oxidado. Se midieron utilizando el métodoespectrofotométrico de Griffith18 en extractos ácidos de pulmón. La concentración de glutatión total se obtuvo mediante la interpolación de los resultados en una curva estándar. Para cuantificar los niveles deglutatión oxidado, las muestras fueron derivatizadas utilizando 2-vinilpiridina. La concentración de proteínas totales, se midió con el método de Bradford19, usando albúmina bovina como estándar....
Glutathione metabolism during postnatal development of the rat lung
Alejandro Ramírez1,2,a, Tatiana Reyes1,2, LeonelLiberona1,2,b, Andrea Bustamente1,2, Claudia Sáez2,3,c, Gisella Borzone1,2.
1Departamentos de Enfermedades Respiratorias y 3Hematología y 2Centro de Investigaciones Médicas, Facultad de Medicina, PontificiaUniversidad Católica de Chile. Santiago, Chile.
aAlumno de Medicina, Pontificia Universidad Católica de Chile
bBioquímico cPhD
Medición de la actividad específica de las enzimas que participanen el metabolismo del glutatión. Se realizó en el homogeneizado del pulmón completo para los animales de 7, 15 y 21 días de vida y en homogeneizados de cada uno de los tres fragmentos de pulmón deanimales de 50 y 70 días.
La actividad de la enzima GPx (glutatión oxidasa) se midió con el método de Gunzler y cois1 , usando tert-butilhidroperóxido como sustrato, para evitar la participación en lareacción de la enzima catalasa, presente en la muestra. Una unidad de GPx en las condiciones experimentales se definió como aquella que cataliza la oxidación de 1 µmol de glutatión por minuto. Losresultados se expresaron como mU/mg proteína.
La actividad de la enzima glutatión reductasa (GRd) se midió con el método de Smith y cois16. Una unidad de GRd en las condiciones usadas se definió comoaquella que cataliza la reducción de 1 µmol de DTNB a TNB por minuto. Los resultados se expresaron como mU/mg proteína.
Niveles de glutatión total y oxidado. Se midieron utilizando el métodoespectrofotométrico de Griffith18 en extractos ácidos de pulmón. La concentración de glutatión total se obtuvo mediante la interpolación de los resultados en una curva estándar. Para cuantificar los niveles deglutatión oxidado, las muestras fueron derivatizadas utilizando 2-vinilpiridina. La concentración de proteínas totales, se midió con el método de Bradford19, usando albúmina bovina como estándar....
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