Metabolismo

ANALISIS MICROBIOLOGICO EN YOGURT
CON PROBIOTICOS
OBJETIVO
Identificar la presencia de Lactobacillus acidofhilus y bifidobacterias en producto terminado.
RESUMEN
Los alimentos con probióticos contienen bacterias vivas que deben mantenerse estables y viables durante el almacenamiento del producto y en número suficientemente elevado que permita sobrevivir a las barreras defensivas naturales yal ecosistema del hospedador y que al ser ingeridas muestren efectos beneficiosos tanto en la prevención como en el tratamiento de desordenes gastrointestinales, tales como: la diarrea infecciosa, diarrea por tratamiento antibiótico, diarrea del viajero entre otras .

Los probióticos más comúnmente utilizados hasta ahora, corresponden a bacterias del ácido láctico, de las cuales se seleccionóespecialmente el Lactobacillus por su resistencia a la acidez gástrica y a las sales biliares y por su habilidad para colonizar el intestino humano. Otras bacterias utilizadas son Bifidobacterium, Entero-coccusfaecium. y levaduras tales como Saccha-romyces boulardii .

Los prebióticos son componentes dietéticos tales como carbohidratos específicos que pueden ser utilizados selectivamente comonutrientes por las especies probióticas y con ello aumentar su número, previniendo de esta manera la colonización del intestino por probables patógenos.

MATERIALES Y METODOS

Debido a que el yogurt tiene un pH menor que 4.5 se tamponó 1 ml del producto con 1 ml de buffer fosfato a pH 7. De esta solución se extrajeron 1 ml que se mezclaron con 9 ml de agua peptonada al 0.1% para tener unasolución de 10 –1. Se deja incubar por 24 horas para luego proceder a la siembra

1. Para la detección de microorganismos contaminantes en general se sembró en agar sangre
AGAR SANGRE:
Para la detección de Lactobacillo se sembró 1 ml. de las diluciones 10–1 en agar sangre a 37º C por 24 horas
Composición por Litro:
* Digestivo pancreático de caseína -15g
* Peptona desoja - 5g
* Cloruro sódico-5g
* Agar-15g

2. Para la detección de E.coli se sembró 1 ml en 15 ml. de agar levine incubando a 37º C por 48 horas.
AGAR LEVINE:
Medio para el aislamiento y la diferenciación de los Escherichia coli y enterobacterias, fermentadores de lactosa y no fermentadores de lactosa.
Composición por Litro:
* Peptona pancreática- 10g* Lactosa - 10g
* Fosfato Dipotásico- 2g
* Agar- 15g
* Eosina- 15g
* Azul de metileno- 0.065g
* pH 7.1+- 0.2 a 25 grados

3. Para la detección de Salmonella spp. se sembró por aislamiento en agar SS a 35º C por 7 dias. Para observación de la aparición de cualquier colonia sospechosa
AGAR SALMONELLA-SHIGELLA
Mediopara el aislamiento de salmonelas y de Shigella.
Composición por Litro:
* Peptona de casina y carne- 5g
* Extracto de carne de buey- 5g
* Lactosa- 10g
* Citrato sódico- 8.5g
* Tiosulfato sódico- 8.5g
* Citrato de hierro- 1g
* Sales Biliares- 8.5g
* Rojo neutro- 0.025g
* Agar- 15g* Verde brillante- 0.3mg

4. Para la detección de hongos levaduriformes y filamentosos se sembró 1 ml de las diluciones 10 –1 agar Sabouraud incubando a 27º C por 7 días.
AGAR SABOURAUD:
Medio para la detección y aislamiento de hongos en muestras mediante técnica de filtración por membrana. Para que ocurra el crecimiento selectivo de hongos sobre bacterias en la muestra dependetan solo de la reacción ácida (pH 5.6).
Composición por Litro:
* Digestivo pancreático de caseína- 5g
* Peptona de tejido digestivo -5 g
* Dextrosa -40g
* Agar- 15g
5. Para la detección de bifidobacterias se utilizo cultivo fresco para la tinción gran usando método correpondiente.

TINCION GRAM
La tinción de Gram o coloración de Gram...