Metalopeptidasas en Ascaris

Inhibición de metalopeptidasa de
mamíferos en la barrera de defensa del
parasito Ascaris

Biología del parasitismo
Iliana Hetzabet Zazueta Ojeda

Introducción
•Las ascariasis es la parasitosisgastrointestinal para
frecuente en el mundo
•Su prevalencia es mas elevada en países con inadecuada
sanitización
Causa
•Abscesos en el hígado
•Eosinofilia pulmonar
•Cólicos biliares
•Pancreatitis

Ciclobiológico

Manifestaciones clínicas
Depende
1) La carga parasitaria infectante
2) Las características del huésped como la edad, estado
inmunológico.

Mecanismos de evasión
Inhibición
de
blancosdigestivos y proteasas del
sistema inmune
Ejemplos
•Pepsina
•Quimiotripsina / elastasa
•Tripsina
•Catepsinas
•Metalocarboxipeptidasas
(MCPs)
ACI

A/B
N/E

Elastina

Resultados
y
discusiónIdentificación, secuenciación y
clonación de ACI proveniente de Ascaris

Espectrometría de masas/masas

El gen codificante de
ACI se sintetizo por
PCR y se inserto en
plásmidos e pGEM-T
los cuales se clonaron
enE.coli, se colocaron
en
vectores
de
expresión
y
se
secuenciaron

Identificación, secuenciación y
clonación de ACI proveniente de Ascaris

Expresión y purificación de ACI
heterólogos
El gen de ACIconstan de 467 nucleótidos, con una
secuencia de la proteína de 87 residuos. 
•Los primeros 20 restos corresponden a un péptido señal
que precede al residuo aspartato encuentra en el
extremo N delinhibidor purificado.

Estabilidad conformacional
y actividad de ACI
La alta estabilidad puede ser atribuida cinco enlaces disulfuro, que limitan
fuertemente la estructura de ACI.
Se unen fuertemente aproteasas del tipo A/B pero no de tipo N/E

Enzimas digestivas
Células plasmáticas

Inmunolocalización de ACI en Ascaris
LA ACI se encuentro en intestino y la
pared del cuerpo de los dos gusanosmasculinos y en ovario y el útero de los
gusanos hembras

Estructura de ACI en el complejo con
CPA1 humana

Conclusiones
La inhibición preferencial de la MCP es en células del
intestino y en células...