metodo de ensayo por cromatografia

Aplicación del Método de Estándar Interno a la Cromatografía de Gases
Prof. Jorge Castillo R, 18/ Agosto / 2003
Introducción:
El método del estándar interno debe su nombre a la forma como AA = 500 y AB =1000 ( Fig. 1).
se preparan las muestras a ser analizadas. El estándar interno es
una sustancia que se añade a todas las muestras y estándares en
Al calcular los factores se obtiene:cantidad conocida y a la vez en cantidad suficiente para poder ser
determinado sin problemas, Su adición no debe de causar ningún
FB = CB/AB = 0.1/1000 = 0.0001
tipo de interferencia en el análisis, y debe de proporcionar una señal
FA = CA/AA = 0.1/500 = 0.0002
analítica similar al analito en el análisis pero distinguible del mismo.
Además el estándar interno No debe estar presente en la matriz enComo podrá observar existe una
estudio.
relación directa entre estos factores de
respuesta y el área del pico
Los métodos basados en la adición de un estándar interno
cromatografico; Entre mas pequeño
generalmente se utilizan cuando el analista esta interesado en la
sea el factor mas grande será el área y
Figura 1
concentración de uno o algunos de los componentes y el método de
mayorla sensitividad del detector para
análisis es susceptible a errores tanto sistemáticos como al azar.
ese analito. De lo anterior podemos
observar que FB es la mitad de FA y que el detector producirá una
El método esta basado en que cuando las señales del analito y señal (área) para el compuesto B que será el doble de la esperada
del estándar interno responden proporcionalmente a lasfluctuaciones para el compuesto A (empleando mismas condiciones y
del método y del instrumental empleado, entonces la razón de estas concentraciones de A y B).
señales es independiente de tales fluctuaciones; De esta forma el
método compensa por errores provenientes de la manipulación de la
Supongamos
ahora
que
muestra por analizar.
queremos calcular la cantidad del
compuesto A y B en una soluciónUn ejemplo del método lo encontramos en la determinación
desconocida, la cual se inyecta en
espectroscópica de sodio y potasio en suero sanguíneo por emisión
igual cantidad y bajo las mismas
atómica. El estándar interno es generalmente litio el cual tiene una
condiciones que los estándares (ver
señal de emisión comparable al analito pero no se encuentra
fig. 2). En esta mezcla se encontróque
Figura 2
naturalmente en la sangre; La emisión de litio ocurre a diferente
el área de A es igual al área de B. Si
longitud de onda que el sodio y potasio por lo que se puede analizar
nos dejamos llevar simplemente por las áreas de los compuestos
sin problemas de interferencias espectrales; además su adición en la
podemos suponer que habrá igual cantidad (concentración) del
cantidadrequerida no afecta la matriz en estudio (sangre) y no
compuesto A y del compuesto B en la mezcla lo cual seria un grave
interfiere químicamente con el analito. Al llevar a cabo el análisis de
error (de 50%, en este caso) ya que supondríamos factores de
la muestra se determina simultáneamente la lectura de emisión de
respuesta idénticos para ambos compuestos; lo cual es poco común
sodio,potasio y litio, si en algún momento existe un error (fluctuación)
pero... algunas veces ocurre como por ejemplo para algunos
en el análisis, podemos esperar que el mismo afecte de manera
compuestos con isomería espacial (enanteomeros).
similar las lecturas del analito y del estándar interno y podamos
compensar el análisis.
Calculemos las concentraciones de cada componente en la
mezcla empleandolos factores de respuesta previamente calculados:
Factores de Respuesta:
CA = AA/FA = (500)/(5000) = 0.10%
Para aplicar el método del estándar interno a la cromatografía
CB = AB/FB = (500)/(10000) = 0.05%
de gases debemos primeramente emplear correctamente los factores
de respuesta, por lo que se dará a continuación una pequeña
Método del Estándar Interno
introducción a la utilización y...