Metodo Derminacion De Fibra Dietetica Por Kit Megazymeen En Español
Páginas: 5 (1025 palabras)
Publicado: 15 de marzo de 2013
DETERMINACIÓN DE FIBRA DIETÉTICA MEDIANTE KIT MEGAZYME
INTRODUCCIÓN:
La fibra dietética es una mezcla de sustancias orgánicas complejas, incluyendo, no hinchables, más o menos compuestos hidrófobos tales como las cutinas, las suberinas y ligninas; así como una serie de compuestos hidrófilos tales como polisacáridos solubles e insolubles y oligosacáridos no digeribles. El procedimiento para ladeterminación del total la fibra dietética como se describe en este folleto se basan en los métodos de:
Lee et al1 y Prosky et al2, 3 (AOAC 991.43, AOAC 985.29, AACC 32-07 y 32-05 AACC). Sin embargo, las enzimas en el Megazyme Kit de fibra dietética total también se puede utilizar en otros métodos de análisis de fibra dietética como el método AACC 32-21 y el método de la AACC 32-06.
PRINCIPIO(LA FIBRA DIETÉTICA TOTAL):
La fibra dietética total (FDT) se determina en muestras duplicadas secas y con poca grasa (contenido de grasa debe ser < 10% del material). Las muestras se cocinan a ~100°C con calor estable en presencia de α-amilasa para dar gelatinización, hidrólisis y despolimerización de almidón; se incuban a 60 ° C con la proteasa (a solubilizar y despolimerizar proteínas) yamiloglucosidasa (a hidrolizar fragmentos de almidón a glucosa); y se trata con cuatro volúmenes de etanol para precipitar la fibra soluble y eliminar despolimerizado proteínas y glucosa (a partir de almidón) El residuo se filtra;. se lava con 78% de etanol, 95% de etanol y acetona; se seca, y se pesa uno duplicado se analiza para la proteína y el otro se incuba a 525 ° C para determinar ash. La TDFes el peso del filtrado y se seca el residuo menos el peso de la proteína y cenizas.
La principal ventaja del kit de prueba Megazyme TDF es que contiene las enzimas de alta pureza que carecen de las actividades de interferencia, y las actividades de las enzimas están estandarizadas. La importancia de normalizado α-amilasa en la medición de almidón resistente es bien reconocido. AmiloglucosidasaMegazyme es esencialmente desprovista de celulosa, mientras que otros preparados de uso común contienen contaminación significativa con esta actividad, lo que conduce a solubilización y la subestimación de β-glucano. Todos los TDF Megazyme enzimas se suministran en una lista para su uso, estabilizada, en forma líquida.
ÁMBITO DE APLICACIÓN:
Aplicable a los granos de cereales, frutas yverduras, cereales y fruta
productos y alimentos.
ENZIMA PUREZA Y DE NORMALIZACIÓN:
La eficacia y la pureza de Megazyme α-amilasa, proteasa y amiloglucosidasa se han evaluado utilizando las normas recomienda en el método AOAC 985.29 y 991.43, y la AACC Método 32-05. Megazyme termoestable α-amilasa (E-BLAAM) tiene una actividad de 3.000 U / ml (método Ceralpha); proteasa se suministra a unaconcentración de 50 mg / ml (~ 350 unidades de tirosina por ml), y amiloglucosidasa se suministra a una concentración de 200 U / ml (p-nitrofenil β-maltósido sustrato) (o 3200 u / ml en almidón soluble). Esta actividad amiloglucosidasa es 150% de la concentración tradicionalmente utilizado en los ensayos de TDF, de modo que 0,2 ml (en lugar de 0,3 ml) es utilizado en el ensayo.
AmiloglucosidasaMegazyme (E-AMGDF) es esencialmente desprovista de celulosa, mientras que en otras preparaciones utilizadas para la determinación de TDF, la contaminación de celulosa puede ser tan alta como 1% de la amiloglucosidasa (sobre una base de actividad). Este nivel de contaminación conduce a una subestimación de β-glucano por tanto como 10-15%.
Los métodos utilizados para la medición y la normalizaciónde Megazyme α-amilasa, proteasa y amiloglucosidasa, y para la medición de celulosa, xilanasa y contaminación pectinasa, están disponibles bajo petición.
TDF Kit de ensayo:
Kits con reactivos para 200 ensayos están disponibles en Megazyme e incluirá:
1. Método de ensayo completo.
2. Termoestable α-amilasa (20 ml) (E-Megazyme BLAAM).
3. Purificada proteasa (20 ml) (E-Megazyme BSPRT).
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INTRODUCCIÓN:
La fibra dietética es una mezcla de sustancias orgánicas complejas, incluyendo, no hinchables, más o menos compuestos hidrófobos tales como las cutinas, las suberinas y ligninas; así como una serie de compuestos hidrófilos tales como polisacáridos solubles e insolubles y oligosacáridos no digeribles. El procedimiento para ladeterminación del total la fibra dietética como se describe en este folleto se basan en los métodos de:
Lee et al1 y Prosky et al2, 3 (AOAC 991.43, AOAC 985.29, AACC 32-07 y 32-05 AACC). Sin embargo, las enzimas en el Megazyme Kit de fibra dietética total también se puede utilizar en otros métodos de análisis de fibra dietética como el método AACC 32-21 y el método de la AACC 32-06.
PRINCIPIO(LA FIBRA DIETÉTICA TOTAL):
La fibra dietética total (FDT) se determina en muestras duplicadas secas y con poca grasa (contenido de grasa debe ser < 10% del material). Las muestras se cocinan a ~100°C con calor estable en presencia de α-amilasa para dar gelatinización, hidrólisis y despolimerización de almidón; se incuban a 60 ° C con la proteasa (a solubilizar y despolimerizar proteínas) yamiloglucosidasa (a hidrolizar fragmentos de almidón a glucosa); y se trata con cuatro volúmenes de etanol para precipitar la fibra soluble y eliminar despolimerizado proteínas y glucosa (a partir de almidón) El residuo se filtra;. se lava con 78% de etanol, 95% de etanol y acetona; se seca, y se pesa uno duplicado se analiza para la proteína y el otro se incuba a 525 ° C para determinar ash. La TDFes el peso del filtrado y se seca el residuo menos el peso de la proteína y cenizas.
La principal ventaja del kit de prueba Megazyme TDF es que contiene las enzimas de alta pureza que carecen de las actividades de interferencia, y las actividades de las enzimas están estandarizadas. La importancia de normalizado α-amilasa en la medición de almidón resistente es bien reconocido. AmiloglucosidasaMegazyme es esencialmente desprovista de celulosa, mientras que otros preparados de uso común contienen contaminación significativa con esta actividad, lo que conduce a solubilización y la subestimación de β-glucano. Todos los TDF Megazyme enzimas se suministran en una lista para su uso, estabilizada, en forma líquida.
ÁMBITO DE APLICACIÓN:
Aplicable a los granos de cereales, frutas yverduras, cereales y fruta
productos y alimentos.
ENZIMA PUREZA Y DE NORMALIZACIÓN:
La eficacia y la pureza de Megazyme α-amilasa, proteasa y amiloglucosidasa se han evaluado utilizando las normas recomienda en el método AOAC 985.29 y 991.43, y la AACC Método 32-05. Megazyme termoestable α-amilasa (E-BLAAM) tiene una actividad de 3.000 U / ml (método Ceralpha); proteasa se suministra a unaconcentración de 50 mg / ml (~ 350 unidades de tirosina por ml), y amiloglucosidasa se suministra a una concentración de 200 U / ml (p-nitrofenil β-maltósido sustrato) (o 3200 u / ml en almidón soluble). Esta actividad amiloglucosidasa es 150% de la concentración tradicionalmente utilizado en los ensayos de TDF, de modo que 0,2 ml (en lugar de 0,3 ml) es utilizado en el ensayo.
AmiloglucosidasaMegazyme (E-AMGDF) es esencialmente desprovista de celulosa, mientras que en otras preparaciones utilizadas para la determinación de TDF, la contaminación de celulosa puede ser tan alta como 1% de la amiloglucosidasa (sobre una base de actividad). Este nivel de contaminación conduce a una subestimación de β-glucano por tanto como 10-15%.
Los métodos utilizados para la medición y la normalizaciónde Megazyme α-amilasa, proteasa y amiloglucosidasa, y para la medición de celulosa, xilanasa y contaminación pectinasa, están disponibles bajo petición.
TDF Kit de ensayo:
Kits con reactivos para 200 ensayos están disponibles en Megazyme e incluirá:
1. Método de ensayo completo.
2. Termoestable α-amilasa (20 ml) (E-Megazyme BLAAM).
3. Purificada proteasa (20 ml) (E-Megazyme BSPRT).
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