Metodo Fish

Genetica

1- Que és la técnica FISH?
r. técnica de marcaje de cromosomas en que los cromosomas son hibridados com sondas que emiten fluorescência, permitindo la visualizacion, distincion yestúdio de los cromosomas y posibles anomalias

2- Que significa la palabra FISH?
HIBRIDACION FLUORESCENTE IN SITU

3- Que permite la técnica FISH?
Determinar aneuploidias, microdeleciones,duplicaciones, inversiones y adjudicacion de um marcador genético a um cromosoma (cartografia genética)

4- Cuales son los cromosomas mas usados en la técnica FISH?
13, 18, 21, X, Y

5- Que son las Sondas?Es um segemento de ADN marcado fluorescentemente

6- Cuales son los pasos de la técnica FISH?
*Desnaturalizacion del DNA para separar la doble hélice
*Añadir la sonda de interes
*Las sondashibridan a regiones especificas
*Se tiñen los núcleos com um color de contraste inespecífico

7- Cual es el método directo y el método indirecto de la técnica FISH?
Directo:Las sondas se marcan commoléculas fluorescentes
Indirecto: Las sondas se detectan com anticuerpo fluorescente

8- En que fase de los cromosomas se puede usar la técnica FISH?
Metáfase o Interfase

9- Que se puededetectar en el FISH en metáfase?
Microdeleciones especificas, translocaciones, identificar material extra de origen desconocido.

10- Que tipos de sondas son usadas en FISH en metáfase?
Cósmidos, Sondassatélites y sondas completas

11- Que son los cósmidos?
Secuencias únicas que hibridan com fragmentos pequeños (estúdios de microdeleciones)

12- Que son las sondas satélites?
Son Formadas porsecuencias altamente repetidas que se encuentran cerca de los centrômeros (determinar aneuploidias, identificar el origen de cromosomas marcadores

13- Que son las sondas completas?
Es la suma devarias sondas que hibridan en distintas zonas del cromosoma (cambio de material genético, anomalias estructurales)

14- Que se puede detectar en el FISH en interfase?
Aneuploidias o grandes...