metodos basicos para la obtencion de enterobacterias en el agua: practica de laboratorio





MODULO. Procesos Celulares Fundamentales.­

INDICE
Introducción……………………………………….4
Objetivo…………………………………………...5
SESIONES
Primera sesión……………………………………6
“Preparación de las muestras
y cultivo en un medio selectivo”

Segunda sesión…………………………………..8
“Aislamiento y observación de
las características macroscópicas
y microscópicas de las
enterobacterias”

Tercerasesión…………………………………..11
“Pruebas bioquímicas para
enterobacterias”

Cuarta sesión……………………………………14

Resultados……………………………………...18

Discusión………………………………………..20

Conclusión………………………………………21

Anexos…………………………………………..21

Cuestionario…………………………………....22

Bibliografía……………………………………...34














INTRODUCCION
La presencia de Enterobacteriaceae dentro del organismo es normal, pero puede determinar laaparición de infecciones, cuya gravedad depende principalmente de la capacidad patológica o de la virulencia de la especie en cuestión y de las características del hospedador. Introducidas por los alimentos, provocan problemas intestinales al adherirse y atravesar la barrera de la mucosa gastrointestinal, manifestada por diarreas y deshidratación.
Las enterobacterias son causantes de un gran número deenfermedades infecciosas en el humano, entre las más comunes se encuentran los síndromes diarreicos y disentéricos, causados por cepas de Escherichia Coli, Salmonella y Shigella.
La familia enterobacteriaceae está formada por aproximadamente 31 géneros y 139 especies y miles de serotipos. Algunos miembros de la familia siempre se asocian a enfermedades cuando se aíslan en el hombre.
Por lo tantoen esta práctica identificaremos este tipo de enterobacterias llevando la siguiente metodología
Descrita consta de cuatro sesiones:
1. Preparación de las muestras y cultivo en un medio selectivo.
2. Aislamiento y observación de las características macroscópicas y microscópicas de las enterobacterias.
3. Pruebas bioquímicas para enterobacterias.
4. Identificación de las enterobacterias.OBJETIVO.
El objetivo de las practica de laboratorio fue aprender a identificar los microorganismo observados en el microscopio por medio de la aplicación de pruebas bioquímicas tales como TSI, VP, RM, Citrato de Simmons, Ácido Sulfhídrico, entre otras, y posteriormente mediante el análisis de los datos obtenidos, hacer una comparación de nuestros resultados con la bibliografíaconsultada.



















Primera Sesión “Preparación de las muestras y cultivo en un medio selectivo”
El alumno aprenderá a preparar la muestra y a sembrarla por estría cruzada para obtener colonias aisladas.
MATERIALES
4 Caja de agar Mac Conkey
1 Tubo estéril con tapón de rosca o de algodón de 16 x 150 ml
1 Pipeta estéril de 10 ml
2 Pipeta estéril de 1 ml
1pipeteador manual
1 Mechero Bunsen
1 Gradilla
1 Pipeta Pasteur
1 Matraz con 250 ml de solución salina isotónica (SSI), estéril.

PROCEDIMIENTO
1. Preparación de la zona estéril para el trabajo microbiológico.
Lava con agua y jabón la superficie de la mesa de laboratorio, déjala secar y desinféctala con la solución de hipoclorito de sodio al 10% que preparaste. Coloca el mechero sobre la mesa yenciéndelo, dejar que seque la mesa.
2. Siembra del agua y sus diluciones en el medio Mac Conkey.
Utiliza un hisopo estéril o en su defecto el asa bacteriológica esterilizada para cada una de las siembras.
Utiliza dos cajas de agar Mac Conkey para cada muestra. Una para la muestra sin diluir y otra para la dilución 1:10.
Antes de realizar la siembra etiqueta perfectamente la caja de Petri conun marcador de tinta indeleble en la parte de debajo de la caja.


3. Sembrado.
Humedece solamente la punta del algodón de un hisopo estéril con la muestra y descarga su contenido en forma circular cerca de un borde de una caja de agar Mac Conkey estéril.
Esteriliza el asa bacteriológica calentándola al rojo vivo en la flama del mechero, para enfriar, sumerge...