METODOS CITOGENETICOS
Páginas: 2 (318 palabras)
Publicado: 14 de junio de 2015
METODOS CITOGENETICOS-OBTENCIÓN DE CROMOSOMAS METAFASICOS
Introducción
El análisis de cromosomas se puede realizar de una gran variedad de muestras (Medula ósea, tejido amniótico, vellosidadescoriónicas, testículos, linfocitos T y B etc.); siendo el cultivo in vitro de linfocitos de sangre periférica un método rápido que provee células en división específicamente en metafase; etapa donde loscromosomas alcanzan su máximo grado de condensación.
Objetivo
Observar los cromosomas metafásicos en las muestras obtenidas.
Comprender la funcionalidad de cada componente en la técnica de cultivo.Metodología
Cultivo de linfocitos humanos a partir de sangre periférica (Moorhead y Col.)
El método es simple, consiste en obtener una muestra de sangre venosa en vacutainer heparinizado (daño enmenor grado), para evitar la coagulación de la sangre.
Para la proliferación de los linfocitos es necesario cultivarlos en un medio de cultivo especial a base de SBF (aporte de nutrientes) yFitohemaglutinina (induce la división celular).
Para detener la división celular en metafase, se utiliza Colchicina, agente que evita la polimerización del huso mitótico (Thompson, 2008).
Para una adecuadadispersión de los cromosomas, los cuales no deben de aparecer encimados, se agrega una solución hipotónica de Cloruro de Potasio (KCl); hace que las células se expandan e hinchen.
Para la fijación conSolución de Carnoy (matar, preservar, evitar putrefacción y autolisis de la célula) es necesario; Ácido acético glacial (Prefijacion) y Etanol (Fijación) en proporción 3:1. Al término se efectúa elextendido y coloración con Giemsa.
Resultados
Se apreció la dispersión y extensión de cromosomas metafásicos así como una leve sobre posición de unos con otros que dificulta la observación o conteo.Conclusiones
Se lograron observar cromosomas metafásicos.
Mediante la estandarización de la técnica para el cultivo de linfocitos se logró transmitir la funcionalidad e importancia de cada componente....
Introducción
El análisis de cromosomas se puede realizar de una gran variedad de muestras (Medula ósea, tejido amniótico, vellosidadescoriónicas, testículos, linfocitos T y B etc.); siendo el cultivo in vitro de linfocitos de sangre periférica un método rápido que provee células en división específicamente en metafase; etapa donde loscromosomas alcanzan su máximo grado de condensación.
Objetivo
Observar los cromosomas metafásicos en las muestras obtenidas.
Comprender la funcionalidad de cada componente en la técnica de cultivo.Metodología
Cultivo de linfocitos humanos a partir de sangre periférica (Moorhead y Col.)
El método es simple, consiste en obtener una muestra de sangre venosa en vacutainer heparinizado (daño enmenor grado), para evitar la coagulación de la sangre.
Para la proliferación de los linfocitos es necesario cultivarlos en un medio de cultivo especial a base de SBF (aporte de nutrientes) yFitohemaglutinina (induce la división celular).
Para detener la división celular en metafase, se utiliza Colchicina, agente que evita la polimerización del huso mitótico (Thompson, 2008).
Para una adecuadadispersión de los cromosomas, los cuales no deben de aparecer encimados, se agrega una solución hipotónica de Cloruro de Potasio (KCl); hace que las células se expandan e hinchen.
Para la fijación conSolución de Carnoy (matar, preservar, evitar putrefacción y autolisis de la célula) es necesario; Ácido acético glacial (Prefijacion) y Etanol (Fijación) en proporción 3:1. Al término se efectúa elextendido y coloración con Giemsa.
Resultados
Se apreció la dispersión y extensión de cromosomas metafásicos así como una leve sobre posición de unos con otros que dificulta la observación o conteo.Conclusiones
Se lograron observar cromosomas metafásicos.
Mediante la estandarización de la técnica para el cultivo de linfocitos se logró transmitir la funcionalidad e importancia de cada componente....
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