Metodos de analisis microbiologico
Páginas: 8 (1786 palabras)
Publicado: 27 de octubre de 2014
HYPERLINK "http://es.slideshare.net/pduranospina/guias-laboratorio-de-microbiologia-de-alimentos-artticulacin-educacin-media-y-superior" http://es.slideshare.net/pduranospina/guias-laboratorio-de-microbiologia-de-alimentos-artticulacin-educacin-media-y-superiorhttp://www.inmunologiaenlinea.es/index.php/caapss/84-13http://www.unavarra.es/genmic/curso%20microbiologia%20general/12-metodos%20de%20recuento.htmhttp://bvs.sld.cu/revistas/hie/vol51_1_13/hie09113.htmINTRODUCCIÓN
MÉTODOS DE ANÁLISIS MICROORGANISMOS EN ALIMENTOS
MÉTODOS FÍSICOS
Impedancia: Es la resistencia aparente presentada a la corriente alterna. En un cultivo los microorganismos alteran los substratos cambiando su conductividad eléctrica y esto varía la impedancia. El método se basa en detectar estos cambios y lacantidad de microorganismos se expresa como función del tiempo que tarda el cultivo en alcanzar unos valores de impedancia correspondientes a 106 - 107 células por ml-1. (IDT: Imdepedance Detection Time). Es necesario que el medio de cultivo permite un crecimiento homogéneo sin «escalones».
Microcalorimetria: Estudio de los pequeños cambios de calor producidos como consecuencia del antabolismo denutrientes. Los diferentes tipos de microorganismos metabolizan los substratos de forma diferente y, por ello, se ha usado la microcalorimetría para poder identificar las especies presentes en un alimento: usando un medio de cultivo con una composición definida de azúcares pueden llegar a identificarse diferentes tipos de bacterias lácticas mediante los termogramas de su metabolización de losazúcares presentes en el medio.
Citometria de flujo: Método basado en hacer pasar una a una las células de una suspensión por un sistema de detección; este sistema puede contener un detector capaz de medir diferentes parámetros (diferentes tipos de fluorescencia, absobancia, dispersión de luz, etc.) lo que permite identificar las bacterias durante su paso por el detector.
MÉTODOS QUÍMICOS
NucleasaTermoestable: S. aureus produce una nucleasa termoestable con mayor rapidez y en mayor cantidad que la enterotoxina responsable de la intoxicación. La endonucleasa puede detectarse experimentalmente como un índice de la presencia de S. aureus incluso en concentraciones demasiado bajas para que hayan producido unas cantidades detectables de enterotoxina.
Lisado de Limulus: Usado para detección deendotoxinas (derivadas del lipopolisacárido LPS de las bacterias Gram negativas). Se basa en la aglutinación de extractos de amebocito de sangre de Limulus (cangrejo de mar) producido por cantidades del orden de picogramos de LPS. Puede detectar 300 células de E. coli. El método detecta células viables y no-viables. Es muy rápido.
Sondas de ácidos nucleicos: Sirven para identificarmicroorganismo desconocidos por medio de Southern.
PCR: Método para detectar número extremadamente bajos de microorganismos con una cierta rapidez basado de la producción de copias de genes específicos de un microorganismo en cuestión.
Medida de ATP-: Se detecta la presencia de ATP usando luciferasa, aunque hay algunos problemas experimentales que hacen que la técnica sea controvertida.
Radiometria: Medidade la transformación de un substrato con 14C en 14CO2: el tiempo necesario para detectar el 14CO2 es inversamente proporcional a la cantidad de microorganismos presente.
Substratos Fluoro y Cromogénicos: Se añaden como aditivos a los medios de cultivos para facilitar y acelerar la detección de los microorganismos.
MÉTODOS INMUNOLÓGICOS
La utilización cada vez más generalizada de las técnicasinmunológicas en el análisis de los alimentos para detectar la presencia de microorganismos, toxinas u otros metabolitos microbianos, es consecuencia del éxito previo que alcanzaron en el campo del diagnóstico clínico. Las técnicas inmunológicas son procedimientos analíticos basados en la visualización objetiva de la interacción entre un antígeno y su correspondiente anticuerpo, y debido a su...
MÉTODOS DE ANÁLISIS MICROORGANISMOS EN ALIMENTOS
MÉTODOS FÍSICOS
Impedancia: Es la resistencia aparente presentada a la corriente alterna. En un cultivo los microorganismos alteran los substratos cambiando su conductividad eléctrica y esto varía la impedancia. El método se basa en detectar estos cambios y lacantidad de microorganismos se expresa como función del tiempo que tarda el cultivo en alcanzar unos valores de impedancia correspondientes a 106 - 107 células por ml-1. (IDT: Imdepedance Detection Time). Es necesario que el medio de cultivo permite un crecimiento homogéneo sin «escalones».
Microcalorimetria: Estudio de los pequeños cambios de calor producidos como consecuencia del antabolismo denutrientes. Los diferentes tipos de microorganismos metabolizan los substratos de forma diferente y, por ello, se ha usado la microcalorimetría para poder identificar las especies presentes en un alimento: usando un medio de cultivo con una composición definida de azúcares pueden llegar a identificarse diferentes tipos de bacterias lácticas mediante los termogramas de su metabolización de losazúcares presentes en el medio.
Citometria de flujo: Método basado en hacer pasar una a una las células de una suspensión por un sistema de detección; este sistema puede contener un detector capaz de medir diferentes parámetros (diferentes tipos de fluorescencia, absobancia, dispersión de luz, etc.) lo que permite identificar las bacterias durante su paso por el detector.
MÉTODOS QUÍMICOS
NucleasaTermoestable: S. aureus produce una nucleasa termoestable con mayor rapidez y en mayor cantidad que la enterotoxina responsable de la intoxicación. La endonucleasa puede detectarse experimentalmente como un índice de la presencia de S. aureus incluso en concentraciones demasiado bajas para que hayan producido unas cantidades detectables de enterotoxina.
Lisado de Limulus: Usado para detección deendotoxinas (derivadas del lipopolisacárido LPS de las bacterias Gram negativas). Se basa en la aglutinación de extractos de amebocito de sangre de Limulus (cangrejo de mar) producido por cantidades del orden de picogramos de LPS. Puede detectar 300 células de E. coli. El método detecta células viables y no-viables. Es muy rápido.
Sondas de ácidos nucleicos: Sirven para identificarmicroorganismo desconocidos por medio de Southern.
PCR: Método para detectar número extremadamente bajos de microorganismos con una cierta rapidez basado de la producción de copias de genes específicos de un microorganismo en cuestión.
Medida de ATP-: Se detecta la presencia de ATP usando luciferasa, aunque hay algunos problemas experimentales que hacen que la técnica sea controvertida.
Radiometria: Medidade la transformación de un substrato con 14C en 14CO2: el tiempo necesario para detectar el 14CO2 es inversamente proporcional a la cantidad de microorganismos presente.
Substratos Fluoro y Cromogénicos: Se añaden como aditivos a los medios de cultivos para facilitar y acelerar la detección de los microorganismos.
MÉTODOS INMUNOLÓGICOS
La utilización cada vez más generalizada de las técnicasinmunológicas en el análisis de los alimentos para detectar la presencia de microorganismos, toxinas u otros metabolitos microbianos, es consecuencia del éxito previo que alcanzaron en el campo del diagnóstico clínico. Las técnicas inmunológicas son procedimientos analíticos basados en la visualización objetiva de la interacción entre un antígeno y su correspondiente anticuerpo, y debido a su...
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