Metodos De Conservacion Para Microorganismos

Métodos de conservación para microorganismos
Se describen dos métodos de stock y semi stock con distintos márgenes de conservación dados en semanas meses y años
Conservación por el método desemistock en papel filtro
Este método mantienen la viabilidad de los microorganismos en u intervalos de 4 años, fácil de realizar y económico.
Método:
1.- preparación de 4 viales de 2ml por cadasepa a conservar corresponden a una viabilidad de 24 horas, 2 meses, 6 meses y un año.
2.- se adicionan a cada uno 15 discos de papel filtro Whatman No 4 de 5 mm, los cuales se esterilizan a 121oCpor 15 minutos
3.- se realiza un cultivo en caldo BHI incubado a 37oC en agitación a 200rpm para obtener una densidad óptica de 0.4 -.0.5 leído en un espectrofotómetro a 600nm.
4.- se toman 0.1 mlde cada uno de los cultivos realizando una buena homogenización
5.- se almacenan a 4oC
Criopreservacion a -70 oC
Considerado como método stock, con un proceso rápido, bajo índice decontaminación poco laborioso, económico y mantiene las propiedades genéticas de los microorganismos que presentan plásmidos. Propuesto por
1.- preparación de cinco viales por cada cepa, correspondientes a24 horas, 6 meses, 1 año, 2 años y 5 años
2.- se dispersan entre los viales 0.8ml de medio de preservación compuesto por
* Caldo tripticasa de soya 3g
* Glucosa 0.5 g
* Leche descremaden polvo 2g
* Agente crioprotector (glicerol 10 ml)
* Agua destilada 990ml (esterilizada a 10 libras de presión por 10 minutos)
3.- se realiza caldo de cultivo BHI incubado a 37 oC conagitación de 200 rpm, hasta alcanzar una densidad óptica de 0.8 leída en espectrofotómetro a 6oonm.
4.- se distribuye el 0.8ml del caldo de cultivo en cada uno de los viales con los previos 0.8 ml demedio de preservación para realizarse una homogenización por vortex durante 10 segundos.
5.- se refrigera a 4 oC por 15 minutos para un periodo de equilibrio e inmediatamente se congelan a -70 oC...