Metodos De Cultivo. Tecnica Por Dilucion

PRACTICA #7:
METODOS DE CULTIVO
TÉCNICA POR DILUCION
Objetivo:
Realizar los diferentes métodos de cultivo empleados para bacterias
a) Técnica por agotamiento de asa
b) Técnica de placa vertida
c) Siembra por estría en tubo inclinado
d) Siembra por dilución
ANTECEDENTES.
El cultivo puro representa las condiciones artificiales para el desarrollo de las bacterias y otrosmicroorganismos y las condiciones impuestas a los microorganismos mediante el manejo del laboratorio. Para determinar las características de especies concretas de microorganismos, es imperativo que el organismo se aísle y se desarrolle en el laboratorio como un cultivo puro. Existe gran variedad de técnicas por medio de las cuales las diferentes especies en una muestra natural pueden ser aisladas ydesarrollarse como cultivo puro.
METODOS PARA AISLAR CULTIVOS PUROS
Técnica de la placa vertida:
el principio de la técnica de la placa vertida es la dilución de la muestra en tubos con agar fundido y enfriado. Se necesita hacer diluciones en más de un tubo para obtener colonias bien aisladas. El medio se mantiene al estado liquido a una temperatura de 45°C para permitir que el inoculo sedistribuya adecuadamente en el medio. Una vez sembrado el medio se pone en cajas petri, se deja solidificar y después se incuba. Como algunos microorganismos quedan atrapados entre el agar, se observaran colonias tanto en la superficie como entre el medio cuando este solidifica. Esta técnica se hace en forma cualitativa o cuantitativa.
Las técnicas de placa vertida para aislar cierta clase debacterias, pueden mejorarse con medios de cultivos selectivos o diferenciales. También es posible tratar el medio para eliminar otro tipo de bacterias diferentes de las que se desea aislar, antes de sembrar en las placas.

Técnica de las diluciones en serie:
Si el microorganismo que se busca en un cultivo mixto se encuentra en mayos cantidad que cualquiera de los otros microorganismos, es posibleobtenerlo en cultivo puro mediante una serie de diluciones en tubo, del medio de cultivo apropiado. Cuando la muestra este muy diluida contendrá solamente la bacteria que buscamos. Aunque es recomendable confirmar mediante el procedimiento de la siembra en placa la pureza del cultivo que se aisló de la manera descrita.
MANTENIMIENTO Y PRESERVACION DE CULTIVOS PUROS.
Directamente relacionado alestudio de cultivos puros está el problema de su mantenimiento en condiciones viables por varios periodos. Es muy importante tener perfectamente identificadas las bacterias de los cultivos puros listas para usarse. Desde luego que cada laboratorio dispondrá de colecciones de cultivos de acuerdo con sus necesidades e intereses principales, tanto de enseñanza como de investigación.
Métodos depreservación
A fin de desarrollar condiciones propias para la preservación de bacterias se ha realizado un considerable número de investigaciones. No todas las especies responden de manera similar a los procesos y condiciones especificas, lo que significa que lo que se ha aprendido para un cultivo puede no ser aplicable para otro. Es esencial que el método de preservación y mantenimiento conserve todaslas características de las especies como fueron en el momento de la preservación. Debemos hacer varias consideraciones prácticas tales como la cantidad de trabajo consumido, así como el espacio que se necesita para almacenarlos. Algunas de las técnicas de uso son las siguientes:
* Resiembra periódica a medios frescos.
* Preservación de cultivos con una capa de aceite mineral.
*Preservación de cultivos por secado rápido en congelación (liofilización).
* Almacenamiento a temperaturas muy bajas.

CARACTERISTICAS DEL CULTIVO
Una de las características principales es su apariencia seguida del crecimiento en diferentes medios de cultivo. Estas características generales como el color, abundancia de crecimiento y aun el olor del cultivo nos pueden servir de guias para la...