Metodos de estudio histologico

MÉTODOS DE ESTUDIO EN

HISTOLOGÍA

TINCIONES EN HISTOLOGÍA
HISTOTECNOLOGÍA Conjunto de técnicas que se llevan acabo para la preservación y preparación de los tejidos y células, para su estudio con microscopio de luz y sus variantes

OBJETIVOS BÁSICOS DE LA HISTOTECNOLOGÍA
1. Preservación optima y funcional de los diferentes materiales tisulares y celulares que llegan al laboratorio. 2.Conocer los principios de las técnicas rutinarias y especiales, así como sus indicaciones precisas para el estudio de los tejidos

MATERIAL A ESTUDIAR
INCISIONAL

BIOPSIAS

EXCISIONAL

NECROPSIA O AUTOPSIA CITOLOGÍA EXFOLIATIVA FROTIS E IMPRONTAS

TÉCNICA HISTOLÓGICA
Comprende la preparación de tejidos para su estudio microscópico Se logra sometiéndolos a una serie de procesos:
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Obtención del tejido a estudiar Fijación Deshidratación Aclaramiento Inclusión Corte Montaje Observación (Diagnóstico)

MATERIAL A ESTUDIAR
INCISIONAL

BIOPSIAS

EXCISIONAL

NECROPSIA O AUTOPSIA CITOLOGÍA EXFOLIATIVA FROTIS E IMPRONTAS

FIJACIÓN
La fijación tiene por objeto matar las células y conservarlas, hasta donde sea posible Es un método histológico destinado aobtener preparados duraderos que conservan la estructura morfológica y química de las células y tejidos al estado vivo y que permite realizar, posteriormente, los procedimientos de coloración o de identificación que facilitan el completo conocimiento de su constitución íntima

FIJACIÓN

FIJACIÓN
CUALIDADES DE UN FIJADOR 1. Actuar con rapidez, matando y fijando a las células antes de queaparezcan autólisis, desintegración, etc.). 2. Poseer alto poder de penetración para asegurar la fijación correcta hasta en las capas profundas 3. Conservar, en lo posible, los detalles estructurales que presentaban in vivo 4. Permitir o favorecer el empleo de los procedimientos necesarios para su observación ulterior (ejecución de cortes, coloración, etc.) 5. Impedir la desaparición de los elementossolubles durante la fijación o después de ella 6. No provocar o impedir la producción de estructuras artificiales 7. No retraer excesivamente los tejidos ni volverlos friables o quebradizos.

FIJACIÓN
COMO ACTÚAN LOS FIJADORES? Varía con la composición o naturaleza Coagulando las proteínas sin combinarse con ellas (alcohol, ácido pícrico, yodo, calor) Formando combinaciones químicas con lassustancias orgánicas (ácido crómico y sus sales), o reduciéndose en contacto con las mismas y originando en su seno un precipitado sumamente fino (ácido ósmico, bicloruro de mercurio, cloruro de oro) La mayor parte de los fijadores actúan como oxidantes, favorece la coloración ulterior de los tejidos (recuérdese que éstos, en su mayoría, son reductores que muchos colorantes se transforman enleucobases incoloras al combinar una molécula de hidrógeno con su cromóforo)

FIJACIÓN
FIJADORES QUIMICOS

Son los más utilizados; pueden ser Fijadores simples, constituidos por una sola sustancia química Fijadores compuestos o mezclas fijadoras cuando varias sustancias intervienen en su constitución

FIJACIÓN
FIJADORES SIMPLES a) Formol al 10%, es el más usado. Su empleo es aconsejable entodos los casos en que no se disponga de un fijador especial, principalmente cuando se trata de fijar órganos o tejidos para estudios histológicos topográficos. b) Alcohol etílico absoluto o de 96%, se usa generalmente en microquímica. c) Alcohol metílico, se lo emplea con frecuencia para fijar frotis desecados (sangre, médula ósea, ganglio, bazo, líquidos de punción, etc.). d) Ácido ósmico al 1ó 2%, es poco penetrante pero enérgico, conserva muy bien estructuras celulares. e) Bicromato de potasio al 3-5%.

FIJACIÓN
FIJADORES COMPUESTOS

En su composición intervienen un número variable de fijadores simples racionalmente elegidos con el fin de completar la acción de cada uno de ellos o atenuar sus efectos

FIJACIÓN
FIJADORES COMPUESTOS a) Líquido de Fleming, mezcla...