Metodos De Separacion De Proteinas

Separación proteica por diálisis, se basa en la separación de proteínas por medio de una membrana semipermeable en la que no pasan las proteínas pero si otras moléculas; se sumerge la proteína que sequiere separar, en una solución tamponada con lo que se formara una diferencia de concentración entre los medios externos e internos de la membrana, saliendo moléculas mas pequeñas que lasproteínas
En la parte interna de la membrana se pueden ver proteínas mientras en la externa solo pequeñas moléculas

Cromatografía en columna, se introduce una columna con material solido poroso conpropiedades adecuadas a la cual se le da el nombre de fase estacionaria y una solución tamponada que se desplazara durante el proceso llamada fase móvil. Para el proceso de separación se tienen en cuentadiversos factores como la carga de las moléculas a separar, su tamaño su afinidad electrónica.
-Intercambio catiónico: la fase estacionaria tiene grupos cargados negativamente por lo que las proteínascon cargas positivas migran más lentamente
-Cromatografía de exclusión molecular: la fase solida contiene pequeñas partículas que hacen que las moléculas mas pequeñas pasen a través de ellas,mientras las grandes rodean esta fase estacionaria, debido a que no pueden cruzar atreves de las pequeñas partículas saliendo primero
-Cromatografía de afinidad: la columna tiene un grupo afín (con el queformara un enlace covalente) al que la proteína se unirá y por tanto se retardara su migración

-HPLC: se utilizan bombas de alta presión; utilizando un flujo presurizado las proteínas quedansectorizadas en la fase estacionaria. Esta técnica utiliza una fase estacionaria polar y una fase móvil apolar la cual luego pasa a un detector que analiza el resultado obtenido
Partes de la hplc normalElectroforesis: una proteína se desplaza en un campo eléctrico; se realiza en gel de poliacrilamida que retrasa el desplazamiento en una relación carga/masa aproximadamente y al aplicar una...