Metodos De Siembra De Bacterias

METODOS DE SIEMBRA , AISLAMIENTO Y RECUENTO DE BACTERIAS
OBJETIVOS
Aprender diversos métodos de siembra.
Realizar un aislamiento en placas de agar y recuento de bacterias como escherichie coli mediante el método de extensión en superficies con asa de vidrio.
Realizar en siembro de una muestra de estafilicocos mediante la técnica de estría múltiple de superficie.
Realizar un recuento delas bseudomonas sembradas utilizando el método de dilución en masao inmersión.
FUNDAMENTO TEORICO
El crecimiento de microorganismos no se puede estudiar individualmente debido a su tamaño tan pequeño es por ello que es necesario recurrir a medios nutritivos artificiales donde se puedan desarrollar rápidamente y producir grandes poblaciones para estudiarlas y manipularse condiciones deseadas.-MEDIOS DE CULTIVO: Se denomina medio de cultivo material alimenticio en el que crecen los microorganismos este crecimiento se denomina cultivo. Este método nos permite identificar y observar el crecimiento de bacteria. En la actualidad existen mas de 10000medios de cultivo diferentes.
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe de reunir una seria decondiciones como son: temperatura, grado de humedad y presión de oxigeno adecuado, así como un grado correcto de acidez o alcalinidad. Un medio de cultivo debe de contener los nutriente y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo microorganismo contaminante .Todo esto esta incluido en el agra nutritivo.
El agar es un elemento solidifican te muy empleado para la preparación demedios de cultivo. Se licua completamente a la temperatura del agua hirviendo y se solidifica al enfriarse a 40 grados .con minimas excepciones no tiene efecto sobre el crecimiento de las bacterias y no es atacado por aquellas que crecen en el.
-CONDICIONES PARA EL CRECIMIENTO DE UN MICROORGANISMO:
EXISTEN MUCHOS FACTORES QUE PERMITEN EL BUEN CONTROL DE CRECIMIENTO DE UN CULTIVO DE BACTERIAS ENTRELOS CUALES ESTAN:
Disponibilidad de nutrientes.- Un medio de cultivo adecuado para la investigación microbiológica ha de contener como mínimo , carbono , nitrógeno ,azufre , fosforo y sales inorgánicas .En muchos casos serán necesarias ciertas vitaminas y otras sustancias inductoras del crecimiento .Siempre han de estar presentes las sustancias adecuadas para ejercer de donantes o captadores deelectrones para las reacciones químicas que tengan lugar .
Consistencia adecuada del medio.- Actualmente los medios líquidos cuyo uso está ampliamente extendido en el laboratorio.
Presencia o ausencia de ciertos gases.-Gran cantidad de bacterias pueden crecer en una atmosfera con tensión de oxigeno normal .Algunas pueden obtener el oxigeno directamente de varios sustratos.
Condiciones dehumedad.- Un nivel mínimo de humedad, tanto en el medio como en la atmosfera, es imprescindible para un buen desarrollo de las células vegetativas microbianas en los cultivos .Hay que prever el mantenimiento de estas condiciones mínimas en las estufas de cultivo a 35-37 ºC proporcionando una fuente adecuada de agua que mantenga la humedad necesaria para el crecimiento de los cultivos y evitar así quese deseque el medio.
Luz y pH .- La mayoría de microorganismos se desarrollan en la oscuridad pero también hay microorganismos que necesitan la luz como los organismos fotosintéticos similarmente sucede con la acidez la mayoría de bacterias crece en medios neutros mientras que otros lo hacen en medios ácidos o alcalinos.
Esterilidad del medio.-los medios de cultivo han de estar perfectamenteesteriles para evitar la aparición de formas de vida que puedan alterar , enmascarar o incluso impedir el crecimiento microbiano normal del o de los especímenes inoculados en dichos medios.
Temperatura.-Los microorganismos meso filos crecen de forma optima a temperaturas entre 15 y 43 ºC . Otros como los psicrofilos crecen a 15 0ºC y los termófilos a 80ºC o incluso a temperaturas superiores...