Metodos De Siembra

PRACTICA 6

METODOS DE SIEMBRA















Alejandra Henao López Cód. 801123754
Lexy Johana Herrera Higuita Cód. 801124007
Ximena Silva Zuluaga Cód. 801125807
Gina Vanessa Vélez Vela Cód. 801120072
INTRODUCCION


En Microbiología, todas las manipulaciones deben ser llevadas a cabo de modo que se impida cualquier tipo de contaminación en el área de trabajo.
Se aconsejaque la siembra de todas las muestras a los medios de cultivos se realice bajo una cabina de flujo de aire laminar o en un gabinete de seguridad biológica, con los protectores de plástico o vidrio para el cuello y la cara, las muestras procesadas se las debe considerar como potencialmente infecciosas y manipularlos adecuadamente.
También se deben utilizar guantes de goma o látex biológicos
Lamesada de trabajo debe estar equipada con todos los materiales necesarios para efectuar las siembras, también se debe contar con todos los medios de cultivos necesarios para realizar las siembras.



MARCO TEORICO


Técnica de siembra para aislamiento:



1. ESTRÍA MÚLTIPLE:

Con un asa de siembra, previamente esterilizada, se toma una muestra del cultivo de microorganismos y seextiende sobre un área pequeña de la superficie de la placa con agar nutritivo, en forma de estrías muy juntas, pero sin hacer presión para no dañar el agar.
Se flamea el asa, se enfría y después de rozar la siembra realizada previamente, se extiende de nuevo por otra zona de la placa haciendo nuevas estrías. Este proceso se repite sucesivamente, flameando
y enfriando el asa al comienzo de lassucesivas siembras en estría. Se lleva la placa a incubar, a la temperatura adecuada, siempre en
posición invertida.
Mediante esta técnica se obtienen colonias aisladas a partir de una muestra que contenga un elevado número de gérmenes.

2. TÉCNICA DE LOS CUATRO CUADRANTES:

Se divide la placa en cuatro cuadrantes.
Se toma el inóculo y se siembra consecutivamente en 1-2-3-4.Incubar.
En elcuarto cuadrante, al menos, obtendríamos colonias aisladas.

3. SIEMBRA POR AGOTAMIENTO (O EN SUPERFICIE)

Se realiza una descarga y se realiza estría por toda la placa.





SIEMBRA PARA RECUENTO:

1. Técnica de Barry

En una placa de Petri vacía se deposita un pequeño volumen conocido de muestra y a continuación se añade el medio de cultivo (agar nutritivo) fundido y atemperadoaproximadamente a 45ºC. Se mezclan ambos por rotación suave de la placa. De esta forma los microorganismos se distribuirán de forma homogénea en el medio de cultivo, permitiendo el desarrollo de colonias separadas por todo el agar.


2. De inoculo a dilución conocida y con asa de Dygraski (Barry modificada):

Depositar sobre la superficie de una placa con agar nutritivo una gota
ó 0,1ml de una determinada dilución del cultivo de microorganismos problema y extenderlo con ayuda del cayado, previamente
Esterilizado, en todas las direcciones hasta que esté completamente seco. Incubar la placa, en posición invertida, a la temperatura deseada
(Durante 24, 48 ó 72 horas) según el tipo de microorganismo.
La posición invertida evitará que el agua de condensación se deposite sobrela superficie del medio, dificultando la obtención de colonias aisladas.
Es una técnica usada para el aislamiento de colonias, que permite igualmente el recuento de bacterias viables en la muestra, si conocemos exactamente la dilución.

























OBJETIVOS


• Conocer los diferentes métodos de siembra con el fin de obtener colonias bacterianas bienaisladas.

• Conocer el concepto de colonias bacterianas y métodos de cultivo.

• Identificar métodos eficaces para aislamiento de microorganismos

• Explicar los diferentes tipos de siembra que pueden realizarse

• Familiarizarse con el manejo de microorganismos y con las técnicas de aislamiento en placa de Petri.
• Obtener colonias separadas, utilizando uno o más...