metodos histologicos

UNIVERSIDAD “GRAN MARISCAL DE AYACUCHO”
FACULTAD DE ONDONTOLOGIA
NUCLEO ANZOATEGUI
CATEDRA: HISTOLOGIA




METODOS PARA EL ESTUDIO DE LOS TEJIDOS



PROFESORA:
Dra. Flor Isabel Aguiar
REALIZADO POR:
Br. González R, Daniela P.
C.I: 25.589.674
Br. Larez A, Cesar D.
C.I: 26.359.294

SECCIÓN: 6

Barcelona, 17de Febrero del 2.014
Métodos para el estudio científico de los tejidos.
Formas de obtener una muestra para estudio histológico.
Existen diversos procedimientos que permiten obtener muestras de tejidos y órganos para conseguir preparaciones histológicas de buena calidad.
La biopsia: consiste en la toma de un fragmento de tejido u órgano de un ser vivo. Se realiza a través de una operaciónquirúrgica hecha exprofesamente o durante la intervención quirúrgica efectuada en pacientes y corroborar así un diagnóstico de una determinada lesión. La biopsia puede ser: incisional, excisional, por sacabocados, por punción y absorción, por raspado y trepanación.
La necropsia: las muestras se obtienen de seres muertos: En este caso es recomendable que los tejidos y órganos se obtengan inmediatamentedespués de producida la muerte.


Biopsia Necropsia

Técnica de preparación de tejidos para microscopia óptica.

1. Fijación: consiste en interrumpir los procesos de degradación que aparecen tras la muerte celular, tratando de conserva la arquitectura y composición tisular más próxima posible a como era en elorganismo vivo.

2. Deshidratación: proceso mediante el cual se elimina completamente el agua del espécimen o muestra tisular para que pueda embeber adecuadamente el tejido en aquellos medios de inclusión que no sean hidrosolubles. Se suele realizar usando alcohol etílico en concentraciones crecientes.

3. Aclaramiento: proceso por el cual se consigue la sustitución del agente deshidratante poruna sustancia miscible con el medio de inclusión. Usualmente se realiza con el xileno.

4. Infiltración: proceso que tiene como objeto “rellenar o infiltrar” completamente la muestra histológica con el medio que se va a usar para la imbibición de tejido. Se realiza mediante baños sucesivos en parafina fundida.

5. Encantramiento del tejido y confección de los bloques: consiste en la obtenciónde un bloque solido de tejido más medio de inclusión, mediante el enfriamiento lento a 10-15C.
Se utilizan las llamadas “estaciones de inclusiones”: dispensador de parafina, placa caliente para la orientación de la pieza y placa fría para la solidificación del bloque.

6. Orientación de la pieza: se coloca en la posición adecuada al tipo de corte que se desea realizar (la cara inferior delbloque será la superficie de corte). La parte más blanda del tejido debe cortarse de primero y la parte más dura al final del proceso.
Corte del bloque en un micrótomo de parafina con cuchilla de acero (3-8 µm de grosor).

7. Montaje: colocar los cortes sobre el portaobjetos cubiertos previamente con capa de albumina o gelatina.

8. Coloración: tinción con colorantes histológicos en su mayoríacon solución acuosa (por lo que los cortes incluidos en parafina deben ser “desparafinados” mediante xileno y luego rehidratados con concentraciones de alcohol en agua). El método de tinción más usado es la hematoxilina-eosina (HE).
Técnica de preparación de tejidos para microscopia electrónica.

1. Fijación: el tejido debe ser fijado, endurecido y preservado con glutaraldehido y tetraóxido deosmio, con un cuidadoso manejo del pH, para mantener las membranas y las proteínas celulares en una malla tridimensional resistente. Los aldehídos crean puentes cruzados entre sí y enlaces covalentes con los grupos amino que estén libres en las proteínas. De esta manera se previene la degradación oxidativa por la muerte del espécimen.

2. Deshidratación: el espécimen va a estar en el vacío y...