metodos instrumentales

INSTITUTO TECNOLOGICO DE SONORA
MANUAL DE EXPO´S
METODOS INSTRUMENTALES

Sandra Olivas Beltrán.
04/09/2013




CROMATOGRAFÍA DE LÍQUIDOS
¿QUÉ ES?
Es una técnica para separar mezclas en sus componentes individuales para que puedan ser identificados y cuantificados. En cromatografía líquida (LC), un líquido en movimiento (fase móvil) lleva la muestra a través de una fase estacionaria(el soporte sólido encontrado dentro de una columna de LC). Los componentes de la muestra se separan en base a sus diferencias de afinidad con la fase estacionaria
PRINCIPIOS DE LA TÉCNICA
En la cromatografía líquida, la fase móvil es un líquido que fluye a través de una columna que contiene a la fase fija. La separación cromatografía en HPLC es el resultado de las interacciones específicasentre las moléculas de la muestra en ambas fases, móvil y estacionaria
A diferencia de la cromatografía de gases, la cromatografía de líquidos de alto rendimiento (HPLC, de high-performance liquid chromatography) no está limitada por la volatilidad o la estabilidad térmica de la muestra.
La HPLC es capaz de separar macromoléculas y especies iónicas, productos naturales lábiles, materialespoliméricos y una gran variedad de otros grupos poli funcionales de alto peso molecular. Con una fase móvil líquida interactiva, otro parámetro se encuentra disponible para la selectividad, en adición a una fase estacionaria activa.
La HPLC ofrece una mayor variedad de fases estacionarias, lo que permite una mayor gama de estas interacciones selectivas y más posibilidades para la separación.
La faseestacionaria por su parte puede ser alúmina, sílice o resinas de intercambio iónico que se encuentran disponibles en el mercado. Los intercambiadores iónicos son matrices sólidas que contienen sitios activos (también llamados grupos iono génicos) con carga electrostática (positiva o negativa). De esta forma, la muestra queda retenida sobre el soporte sólido por afinidad electrostática.
Dependiendo dela relación carga/tamaño unos constituyentes de la mezcla serán retenidos con mayor fuerza sobre el soporte sólido que otros, es decir serán adsorbidos, lo que provocará su separación. Las sustancias que permanecen más tiempo libre en la fase senil, avanzan más rápidamente con el fluir de la misma y las que quedan más unidas a la fase estacionaria o retenidas avanzan menos y por tanto tardaránmás en salir o fluir.
Éste es el principio fundamental de la cromatografía. Un ejemplo notable es la cromatografía de intercambio iónico. Las columnas más utilizadas son las de sílice.



ESQUEMA DE FUNCIONAMIENTO



EXPLICACIÓN DE LA IMAGEN ANTERIOR










DIFERENCIAS
A diferencia de la cromatografía de gases, la cromatografía de líquidos de alto rendimiento no está limitadapor la volatilidad o la estabilidad térmica de la muestra.
La cromatografía de alto rendimiento ofrece una mayor variedad de fases estacionarias.
Es capaz de separar macromoléculas y especies iónicas, productos naturales lábiles, materiales poliméricos y una gran variedad de otros grupos poli funcionales de alto peso molecular.
VENTAJAS
Ampliamente utilizada
Gran sensibilidadDeterminaciones cuantitativas exactas
Determinación de compuestos no volátiles
Aplicabilidad a sustancia de interés
Sistemas de pre tratamiento de fases móviles: Para eliminación de gases disueltos y sólidos en suspensión
Calentamiento
Agitación
Filtros
Desgasificación por vacío
APLICACIONES
Fármacos
Bioquímica
Productos de alimentación
Productos de la industria química
Contaminantes
Químicaforense
Medicina clínica.





CROMATOGRAFÍA DE GASES
DEFINICION
La cromatografía es uno de los principales métodos para la separación de especies químicas.
OBJETIVOS DE CROMATOGRAFÍA DE GASES
Proporcionar un gasto o flujo constante del gas transportador (fase móvil)
Permitir la introducción de vapores de la muestra en la corriente de gas que fluye
Contener la longitud apropiada de...