metodos microscopicos

Páginas: 13 (3143 palabras) Publicado: 7 de abril de 2013

METODOS DE ESTUDIO DE LA BIOLOGIA CELULAR y MOLECULAR

Tamaño y biología
Tamaños de células, virus, y otras cosas pequeñas  

La biología es un área muy rica visualmente. Sin embargo muchas de las estructuras y eventos biológicos más interesantes son más pequeños de lo que el ojo humano puede ver sin ayuda. En realidad el ojo humano tiene una resolución de cerca de 100 µm. En el cuadrode abajo note que de todas las estructuras listadas, solamente la célula vegetal está escasamente dentro de nuestra resolución












Desde hace unos 25 años el perfeccionamiento de varios métodos ha facilitado un conocimiento mejor de la estructura y función de los componentes del sistema celular.

Métodos de preparación de células y tejidos para observar estructura, actividadfisiológica, comportamiento y ultraestructura.

Estos métodos requieren de aparatos que prolonguen el poder de resolución del ojo humano a magnitudes muy pequeñas.

El poder de resolución de todo aparato óptico es la capacidad de resolver dos puntos situados uno cerca de otro. Todo aparato óptico tiene una distancia mínima de resolución, que se denomina límite de resolución.

Dimensionesque pueden ser discriminadas por:

ojo humano: de 100 metros a 0,1 milímetro
microscopio óptico: de 0,1 mm a 0,25m (micras)
microscopio electrónico: de10 m a 0,1 nm (manómetro)










La microscopía óptica utiliza como fuente de poder la luz visible (natural o artificial).

El microscopio óptico tiene un limite resolución de cerca de 200 nm (0.2 µm ).  Este limite se debe ala longitud de onda de la luz  (0.4-0.7 µm ). Las células observadas bajo el microscopio óptico pueden estar vivas o fijadas y teñidas.












 
Imagen cortesía de WebPath
(wwwmedlib.med.utah.edu/WebPath/webpath.html) 
 


La microscopía electrónica utiliza como fuente de poder el flujo de electrones en vacío.


El Microscopio Electrónico de Transmisión(MET)  
Elmicroscopio electrónico de transmisión  (MET) tiene un límite de resolución de cerca de 2 nm.  Esto es debido a limitaciones del lente usado para enfocar electrones hacia la muestra.  Un MET mira a replicas de células muertas , después de haber sido fijadas y teñidas  con iones de metales pesados.  Los electrones son dispersados cuando pasan a trabes de una fina sección  del espécimen, y luegodetectados y proyectados hacia una imagen  sobre una pantalla fluorescente. 











Imagen cortesía de WebPath
(www-med.utah.edu/WebPath/webpath.html)








El Microscopio Electrónico de Barrido (MEB) 
El microscopio electrónico de barrido (MEB) también tiene un límite de 2nm. Al igual que el MET, el MEB permite mirar a células muertas, después de haber sido fijadas yteñidas con iones de metales pesados. Con esta técnica los electrones son reflectados sobre la superficie del espécimen.












 
Imagen cortesía de WebPath
(wwwmedlib.med.utah.edu/WebPath/webpath.html) 













 


Para ambos microscopios son indispensables:

I. Un sistema de condensación para iluminar el objeto.
II. Lentes del objetivo que proyectan laimagen agrandada del objeto sobre el plano de la primera imagen (en el microscopio electrónico se emplean lentes magnéticas).
III. Lentes de proyección que proyectan el plano de la imagen sobre el plano de la segunda imagen.

En el microscopio óptico las lentes de proyección pueden ser la combinación de un ocular y el ojo humano o la lente de una cámara, en cambio en el microscopio electrónico laslentes de proyección sólo pueden combinarse con una cámara. La observación directa de la muestra se hace a través de una pantalla fluorescente.

En la práctica los microscopios ópticos tienen lentes que permiten obtener una gran apertura, alta resolución y disminución de las aberraciones cromáticas.

El poder de resolución en los microscopios compuestos resulta de las amplificaciones...
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