Metodos Moleculares De Identificacion De Bacterias

ESCUELA POLITÉCNICA DEL EJÉRCITO
MICROBIOLOGÍA II
Nombre: Katherine Campaña
Fecha: 2011-09-28
Tema: TÉCNICAS MOLECULARES DE DETECCION E IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS
Los microorganismos sonmuy importantes en la vida del ser humano, algunos de ellos son los responsables de infecciones que en últimas estancias podrían terminar en muerte. Se han desarrollado varias técnicas deidentificación de los mismos, los primeros métodos se basaban en la sintomatología del paciente, pero como es de esperarse estos conllevan un sinnúmero de errores graves. Además de la observación macro y micro delos organismos, se han empleado técnicas de tinción y diferenciación. Una técnica simple y rápida es el uso de anticuerpos, pero esta no es conveniente cuando hay una cantidad muy pequeña demicroorganismos. Por otro lado están las técnicas moleculares que analizan los ácidos nucleicos extraídos de los microorganismos. Estas han tenido gran auge en los últimos años ya que son de altaespecificidad y sensibilidad, son rápidas y pueden ser automatizadas. Sin embargo, se requiere de equipo altamente especializado para su diagnóstico. (1,5)
Son abundantes las técnicas moleculares que existenhoy en día, por tanto solo se mencionarán las más importantes. Ya que es posible que dos cadenas sencillas de ADN o ARN se pueden unir para formar una cadena doble existen técnicas basadas enhibridación de ADN entre las más usadas se encuentran: RFLP’s, squash blot y ARN de cadena doble. (1,2)
Una de las técnicas más usadas usadas para la detección de microorganismos es la basada en la reacción encadena de la polimerasa (PCR). Una técnica de PCR normal a la cual se le agrega una sonda de ADN que tiene un quincher y un beacon, cada uno en un extremo. La sonda se une por complementariedad alADN que se va a amplificar, hasta que la polimerasa al amplificar los fragmentos la libera y emite así fluorescencia en proporción al número de fragmentos amplificados. Con esta técnica se puede...