Metodos no invasivos

Muestreo no invasivo.
Existe la opción de obtener muestras viables para posterior investigación sin tener la necesidad colectar al organismo completo, mediante el rastro y la obtención de muestrasde indiquen la presencia del organismo en un hábitat. A este tipo de muestreo se le conoce como muestreo no invasivo y conciste en la obtención de muestras del organismo que indiquen su presencia y nospuedan servir, en este caso, a la aplicación de estudios genéticos, sin tener que afectar la vida del organismo. Tales muestras pueden ser:
* Heces.
* Pelos.
* Plumas.
* Orina.
*Cascara de huevos.
* Escamas.
* Tejidos blandos y duros de organismos muertos.
* Organismos de museo.
Para la extracción de ADN en estas muestras en necesario seguir los procedimientosadecuados para cada tipo de muestras. A continuación se menciona un ejemplo de protocolo a seguir para algunos de los tipos de muestras.
* Heces: Se suspenden las heces en una solución 1:2 de etanolabsoluto y CTAB. El volumen resuspendido de heces es aumentado sucesivamente hasta obtener una muestra de ADN. Las muestras suspendidas son incubadas por alrededor de 2 hr a 70 C y luego de serenfriadas a temperatura ambiente son centrifugadas a 1400 rpm por 10 minutos. El resultante se somete a extracción por el método de etanol-cloroformo. El pellet obtenido es resuspendido en 180 mL de bufferATL y posteriormente se pasa a extracción con el kit.
* Tejidos blandos: Disgregación de la muestra con ayuda de un bisturí e incubar por una noche a 50 C en 1mL de buffer de extracción. Al diasiguiente se completa la extracción por el método de fenol-cloroformo.
* Pelos: Aproximadamente 0,5 del extremo proximal los pelos que se colectaron seran incubados durante una noche a 55 C en 50mLde buffer TNES con el agregado de proteinasa K. Al día calentar la mezcla a 94 C para desnaturalizar la enzima. Se completa la extracción por el método de fenol-cloroformo
Aunque estas muestras...