Metodos Rapidos De Análisis Toxicológico

Universidad Nacional de Educación a Distancia (UNED)






Métodos Rápidos de Análisis Toxicológico












David Font Muñoz





Toxicología Analítica
Máster en Ciencia y
Tecnología Química


ÍNDICE:
INTRODUCCIÓN 2
SCREENING TOXICOLÓGICO 4
Comparación de métodos de screening analíticos 5
MÉTODOS CROMATOGRÁFICOS 6Clasificación de los métodos cromatográficos 6
CROMATOGRAFÍA PLANA 7
Cromatografía en capa fina 8
Cromatografía en capa fina convencional (TLC) 9
Cromatografía en capa fina de alta resolución (HPTLC) 10
TOXI-LAB 11
MÉTODOS ESPECTROSCÓPICOS 13
BIOENSAYOS 15
MÉTODOS DE BIOLUMINISCENCIA 16
Uso de labioluminiscencia en el análisis toxicológico 17
Microtox® 18
Fundamento del método Microtox® 18
Aplicaciones de Microtox® 20
Metodología de Microtox® 20
Otros bioensayos utilizados en el análisis rápido de tóxicos 21
MetPLATE, MetPAD y MetSTICK 21
MÉTODOS INMUNOLÓGICOS 24
TIPOS DE INMUNOENSAYOS 28TÉCNICAS DE PRECIPITACIÓN 29
TÉCNICAS DE AGLUTINACIÓN 29
TÉCNICAS DE INMUNOFLUORESCENCIA 30
TÉCNICAS DE RADIOINMUNOENSAYO 30
TÉCNICAS INMUNOENZIMÁTICAS: ELISA 31
Metodología de un ensayo ELISA 33
Ventajas e inconvenientes de los inmunoensayos 34
BIOSENSORES 34
INMUNOSENSORES ELECTROQUÍMICOS 34CONCLUSIONES 36
BIBLIOGRAFÍA 37
INTRODUCCIÓN
La investigación toxicológica es el “conjunto de procesos analíticos que tienen por objeto el aislamiento, identificación y determinación cuantitativa de los tóxicos, en cualquier ámbito, con el fin de permitir el diagnóstico de intoxicación y esclarecimiento de los hechos”. El análisis toxicológico se divide en varias etapas (Figura 1) yéstas son las siguientes:

1. Toma y conservación de la muestra: Dependiendo de la naturaleza de la muestra (biológica, suelos, aguas, fluidos biológicos…) y de la naturaleza del tóxico, habrá que tomar unas precauciones concretas que aseguren que no haya alteración del analito.
2. Tratamiento de la muestra: Métodos de extracción del tóxico de la muestra. En esta etapa hay que tener en cuenta lanaturaleza del tóxico (orgánica, inorgánica o volátil) y la matriz en la que se encuentra el xenobiótico.
3. Detección, Identificación y Cuantificación del tóxico: Se requieren métodos sensibles y que abarquen el mayor número posible de tóxicos, a fin de descartar su presencia o detectar alguno de ellos. La cuantificación del tóxico se hace siguiendo el proceso desde el principio, se realizaráuna nueva extracción y análisis del xenobiótico. Todas las técnicas disponibles pueden dividirse en dos grupos:

a. Técnicas orientativas o de screening: Inmunoensayos, espectroscopía UV-VIS, cromatografía sobre papel o en capa fina. Proporcionan resultados rápidos y que sirven como orientación para el análisis confirmativo, pero estos resultados, jamás sirven para emitir un informe. Es decir,los resultados negativos, descartan la presencia del tóxico, pero los resultados positivos deben de confirmarse dado que, estas técnicas suelen dar muchos falsos positivos.
i. Reacciones Cromáticas: Ensayos presuntivos que identifican grupos funcionales de las moléculas.
ii. Métodos Cromatográficos: TLC, HPTLC, TOXI-LAB.
iii. Métodos Espectrofotométricos: Barrido al UV a una longitud deonda comprendía entre 220-390 nm.
iv. Bioensayos – Métodos Inmunológicos y Bioluminiscencia (No extractivos): FPIA, RIA, AMIA, ELISA, Inmunocromatografía y MICROTOX.

b. Técnicas confirmativas: Se comprueban los resultados anteriores, o lo obtienen directamente, pues poseen mayor capacidad de discriminación y seguridad. Además, las buenas prácticas de laboratorio (BPL) aconsejan efectuar la...