metodos

INTRODUCCIÓN 
El espectrofotómetro constituye una herramienta fundamental en el laboratorio clínico. Más del 90% de las determinaciones que se realizan en Química Clínica tienen como paso final la lectura de una absorbancia o una transmitancia. El correcto desempeño de los espectrofotómetros es entonces determinante, en última instancia, de la calidad analítica de los resultados que emite ellaboratorio 
El buen funcionamiento de los espectrofotómetros debe ser revisado a intervalos regulares de tiempo. De este modo la verificación periódica de el buen funcionamiento de los espectrofotómetros es un componente esencial para garantizar la calidad de cualquier protocolo y asegurar la precisión de los resultados. 
Para llevar a cabo este tipo de revisiones es común el empleo de sustanciasestándar, los estándares secundarios de calibración permiten comprobar la exactitud de las mediciones del espectrofotómetro con respecto a la absorbancia en el rango visible del espectro y la longitud de onda en el rango visible y ultravioleta. 
Aunque no se han definido claramente los parámetros que deben valorarse para asegurar un funcionamiento óptimo de pueden evaluar algunos criterios comolos siguientes: 

Filtro de vidrio de didimio para exactitud fotométrica. 
Es un filtro solido para la verificación de la precisión de la longitud de ondea n el rango visible y UV y para verificación de la exactitud fotométrica, la exactitud fotométrica se define coma la exactitud en la medida de la absorbancia o del % de transmitancia en la escala de un espectrofotómetro. 

Exactitud de laescala de longitud 
Se refiere a la adecuada selección de la longitud de onda evita que se produzcan desviaciones importantes en la exactitud fotométrica, para esto se utiliza un patrón que contenga un espectro de absorción con picos y valles bien definidos. 

Luz dispersa 
Es aquella luz que llega hasta el detector cuyas longitudes de onda no se encuentran comprendidas en la banda de radiaciónseleccionada por el monocromador, esta puede generar lecturas de transmitancia mayores a las esperadas. 

Ancho de banda 
Se pude definir como la diferencia entre la longitud de onda máxima y minima de las longitudes de onda que salen del monocromador que alcanzan al menos el 50% de transmitancia máxima de la banda de radiación. 
Proporcionalidad o linealidad fotométrica 
Relación entre laintensidad de radiación registrada en el detector de la lectura en general es deseable una relación lineal entre ambas magnitudes. Un intervalo de longitudes de onda o de concentraciones en las que existe una relación lineal entre A vs ʎ o entre A vs C permite evaluar lo que se denomina intervalo dinámico lineal. 


OBJETIVOS 

* Evaluar el rendimiento instrumental de un espectrofotómetro. 
*Verificar la exactitud de la escala de la longitud de onda la presencia de radiación dispersa el ancho de banda, la exactitud fotométrica, la proporcionalidad de respuesta y rendimiento global del instrumento. 

RESULTADOS

A) Exactitud de la escala de longitud de onda

Método del filtro de tierras raras (didimio)

Tabla1. Método del filtro de didimioGrafica 1. Espectro de transmisión del filtro de didimio
Picos
Valles
420-56.2
400-46.4
490-56.8
520-27.2
550-66.8
590-5.8

¿Coincidieron los máximos y/o mínimos con las longitudes de onda informadas por el fabricante y en que longitudes de onda no fue así? 

Los máximos %T (picos), informados por el fabricante, se presentan a las longitudes de onda de 440nm, 510nm, 570nm, los cuales nocoinciden con ninguna longitud de onda máxima (picos) experimental del espectro de transmisión del filtro de didimio. 
Los máximos o picos (%T) generados experimentalmente por el espectro de transmisión del filtro de didimio, se presentaron a las longitudes de onda de 420nm, 490nm y 550nm.

Por otro lado, los mínimos %T (valles) informados por el fabricante, se presentan a las longitudes de...